鼻咽癌组织中S100A8和S100A9的表达及对Wnt/β-Catenin通路的影响

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本论文包括两个部分:(一)鼻咽癌组织中S100A8、S100A9、 Wnt/β-Catenin通路关键蛋白β-Catenin、Wnt/β-Catenin通路靶基因基质金属蛋白酶MMP7表达水平检测以及分析其与临床病理特征的关系;(二)鼻咽癌CNE1细胞中分析S100A8与S100A9对Wnt/β-Catenin通路的影响。第一部分:鼻咽癌组织中S100A8、S100A9、β-Catenin、MMP7表达水平检测以及分析其与临床病理特征的关系目的:观察在鼻咽癌组织中S100A8、S100A9、β-Catenin、MMP7表达水平及其与临床病理特征的关系。方法:1.免疫组织化学方法检测鼻咽癌和鼻咽黏膜炎性组织中S100A8、 S100A9、β-Catenin和MMP7的免疫阳性染色面积百分率。S100A8和S100A9检测了49例鼻咽癌组织、20例慢性鼻咽黏膜炎性组织。β-Catenin和MMP7检测了42例鼻咽癌组织、9例慢性鼻咽黏膜炎性组织。2.利用SPSS16.0统计软件分析所有数据,数据以中位数(四分位数间距)即M(P25,P75)表示,组间之间比较用Mann-Whitney U检验。结果:1.免疫组织化学结果显示,鼻咽癌组织中S100A8、S100A9、β-Catenin和MMP7的阳性染色面积百分率显著高于慢性鼻咽黏膜炎性组织(P均<0.05),其中,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期鼻咽癌组织均高于慢性鼻咽黏膜炎性组织(P<0.05),且Ⅲ和Ⅳ期又高于Ⅱ期(P<0.05)。2.与临床病理特征相关性分析结果显示,鼻咽癌组织中S100A8、p-Catenin和MMP7阳性染色的面积百分率与临床分期有关(P<0.05),与性别和年龄无关。结论:鼻咽癌组织细胞中S100A8、S100A9、β-Catenin和MMP7表达上调,与临床分期有关,晚期鼻咽癌比早中期严重。第二部分:鼻咽癌CNEl细胞中分析S100A8和S100A9对Wnt/β-Catenin的影响目的:检测添加S100A8/A9培养的CNE1细胞中Wnt/β-Catenin通路关键蛋白β-Catenin、靶基因基质金属蛋白酶MMP7的变化。方法:1.采用免疫细胞化学和蛋白免疫印迹方法检测添加1μg/ml S100A8/A9培养的CNE1细胞中Wnt/β-Catenin通路关键蛋白P-Catenin。2.采用RT-qPCR方法检测添加1μg/ml S100A8/A9培养的CNE1细胞中Wnt/β-Catenin通路靶基因基质金属蛋白酶MMP7。结果:1.免疫细胞化学和蛋白免疫印法迹检测β-Catenin的阳性染色细胞及量的变化。结果显示:添加1μg/ml S100A8/A9培养的CNEl细胞中Wnt/β-Catenin通路中的关键蛋白P-Catenin的阳性染色细胞较没有添加S100A8/A9培养的CNE1细胞显著增多、量有所上调。2.荧光定量PCR法检测MMP7的相对表达水平。结果显示:实验组中MMP7基因的相对表达水平较对照组显著上调(P<0.01)。结论:细胞实验结果显示,培养液添加1μg/ml的S100A8/A9培养CNE1细胞,β-Catenin的免疫阳性染色细胞增多,MMP7表达上调。因此,鼻咽癌组织中的S100A8、S100A9有可能通过激活Wnt/β-Catenin通路促进癌细胞的侵袭和迁移。
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