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本文以日本王子造纸公司培育的美洲黑杨(Populus deltoides,简称DD)与辽杨(P. maximowiczii,简称MM)的杂交品种(P. maximowiczii×P. deltoides,简称MD系列)MD110品系的两年生穗条为材料,以水培萌条的顶芽、叶片、叶柄为外植体,探索了各外植体的消毒方法,愈伤组织诱导及分化芽与根的最佳配方,系统研究了山地杨快速繁殖的过程及其影响因素。 以在室内水培萌发的芽、叶片、叶柄为外植体进行消毒处理。结果表明:用芽作外植体时,先用70%酒精消毒10sec,再用0.1%HgCl2加吐温20(数滴)消毒12min,效果最好;叶片、叶柄用70%酒精消毒10sec,再用0.1%HgCl2加吐温20(数滴)消毒10min,效果最好。 在进行愈伤组织的诱导培养时,以芽的生长点为外植体诱导愈伤组织的效果最好。MS+1.15mg/l 6-BA+2.5%蔗糖为最佳诱导培养基,诱导率为100%。 在愈伤组织增殖培养中,在细胞分裂素6-BA含量比较低的培养基上,生长较快,30d直径最大能够增殖到1.1cm,愈伤组织的增殖率为100%,且以后容易诱导出小苗。从经济观点和增殖效率上讲,最适合愈伤组织增殖的培养基为MS+1.15 mg/l 6-BA+2.5%蔗糖。 在愈伤组织的芽分化培养中,在固体和液体培养基上均能使愈伤组织分化出不定芽。在琼脂固体培养基上,1/2(N)MS+0.3mg/l 6-BA+NAA0.1mg/l+2.5%蔗糖为最佳分化培养基组合,其分化率可达94%。在MS+0.2mg/l 6-BA+2.5%蔗糖的液体培养基上,芽的分化率也可以达98%。 在生根培养中,与萘乙酸相比,吲哚丁酸更有利于生根,且根生长粗壮。生根效果较好的培养基为1/2(N)MS+0.05mg/l NAA+2.5%蔗糖。在试管苗移栽中,以蛭石为基质的移栽苗成活率最高,达到90%。以园土与蛭石为基质,其透气性、保湿性虽然比单独的蛭石差,但生长比在其他基质中健壮,且在进入苗圃前不用再次移苗。