小偃麦抗病异代换系的分子细胞学鉴定

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小麦品种的不断改良依赖于遗传变异持续提供,在小麦育种中,小麦与其近缘物种杂交所产生的完全或部分双双--倍体和异代换系是进行目的基因导入的重要环节,因为利用它们,不仅可以对外源基因在小麦背景下的遗传效应进行准确分析,尤其当远缘杂交的F1杂种几乎完全不育时,由于其育性的恢复而可作为桥梁亲本进行外源基因的导入。基因组为StJJs的中间偃麦草(2,2=6x=42)是小麦的野生近缘物种,它具有非常丰富的遗传变异,它可以提高小麦对真菌性病害的抗性,包括小麦的主要病害白粉病和锈病。但迄今为止,还未有兼抗这两种病害、且源于中间偃麦草的异代换或易位系的研究报道。CH08-141是本实验室从普通小麦晋太170与部分双二倍体TAI7047杂交、回交后代中选育的BC1F6高代纯合品系。部分双二倍体TAI7047来源于中间偃麦草Z1141,系谱为‘太原768/Z1141//晋春5号’。在本研究中,利用基因组原位杂交(GISH)和多色基因组原位杂交(mcGISH)技术对CH08-141的基因组构成和外源基因组来源进行了鉴定,并通过人工接种鉴定,对其作为新抗源、增强小麦对白粉病和秆锈病抗性的潜力进行了评价。并取得以下主要结果:1、用世界上毒性最强、流行区域最广的秆锈菌小种Ug99和目前我国北方麦区流行的白粉病小种E09,接种CH08-141及其亲本,包括晋太170,小偃麦TAI7047和其野生亲本中间偃麦草。结果表明:CH08-141及其抗病亲本八倍体小偃麦TAI7047、野生亲本中间偃麦草对Ug99、E09都表现为抗病(免疫或过敏性病斑),然而其普通小麦亲本晋太170、晋春5号和太原768均表现为高感。这一结果说明,CH08-141对这两种生理小种的抗性类似于其供体亲本TAI7047和中间偃麦草,而由于CH08-141、TAI7047的小麦亲本均为高度感染,因此CH08-141对秆锈病和白粉病的抗性来自其野生亲本中间偃麦草。2、染色体计数表明CH08-141染色体数目为2,2=41到2n42,含有42条染色体的植株占大多数。随后通过GISH检测,以确定CH08-141中异源染色体的有无、数目及其基因组构成。以中间偃麦草基因组DNA为探针的GISH结果表明,每个细胞分裂相中均有一对全长都被激发出荧光的为异源染色体,其余20对或39条无信号的染色体为小麦染色体,说明这个品系为含1对中间偃麦草染色体的小麦异源代换系。3、分别以A、B基因组DNA为探针的mcGISH表明,中间偃麦草的1对J组染色体代换了普通小麦(Triticum aestivum.)的1对B组染色体,分别以pSc119.2和pAsl重复DNA序列为探针的多色荧光原位杂交(mcFISH)结果表明,CH08-141中所含的1对外源染色体是中间偃麦草的6J染色体,它代换了小麦的1对6B染色体。与此同时,我们用分布在小麦第6部分同源群染色体上的12对SSR引物进行标记检测,结果表明CH08-141所缺失的正是小麦的6B染色体,证实了细胞学分析的结果。GISH、mcFISH及分子标记的实验证据均证实了CH08-141是一个新的小麦-中间偃麦草6J/6B染色体代换系,抗性评价表明CH08-141作为一个桥梁亲本和多抗性抗源可通过染色体工程途径向小麦转移偃麦草的抗秆锈、抗白粉基因。
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