鼠伤寒沙门氏菌purR超阻遏突变体蛋白质组学分析

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本论文以鼠伤寒沙门氏菌purR超阻遏突变体(菌株5-28)为实验材料,采用蛋白质组学分析方法,研究(1)乳糖选择条件下,菌株5-28蛋白质表达水平的变化;(2)purR超阻遏表型产生的蛋白质基础。结果表明:(1)通过比较丰富培养和乳糖选择条件下菌株5-28可溶性蛋白的2-DE图谱,得到19个差异蛋白点,对其中的12个进行了MALDI-TOF-MS质谱分析,最终确定了8种蛋白,其中5种蛋白表达上调,包括麦芽糖孔蛋白(LamB)、周质麦芽糖结合蛋白(MalE)、D-半乳糖结合周质蛋白前体(GGBP,MglB)、分支酸合成酶和假拟乙醇脱氢酶(YjgB);3种蛋白质表达量下调,包括琥珀酸脱氢酶催化亚基(SdhA)、I相鞭毛蛋白(FliC)和天冬氨酸氨裂解酶(AspA)。根据蛋白质差异表达的情况,推测乳糖选择条件下蛋白质的表达受到σs、cAMP:CRP或σE等调控,以适应细菌在营养胁迫条件下的生存需要。(2)通过比较超阻遏突变体5-28和出发株TT12306的可溶性蛋白2-DE图谱,发现五个差异蛋白点,经MALDI-TOF-MS分析,鉴定出这5种蛋白分别为丝氨酸羟甲基转移酶、甘油磷酰二酯磷酸二酯酶、外膜蛋白OmpW、OmpA和延胡索酸酶。在菌株5-28中,丝氨酸羟甲基转移酶的表达上调2.3倍,而甘油磷酰二酯磷酸二酯酶、OmpW、OmpA和延胡索酸酶的表达分别下调3.3倍、22.7倍、4倍、11.8倍。关于这些蛋白在超阻遏表型产生中的作用,尚需进一步实验鉴定。
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