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目的:环氧化酶(Cyclooxygenase,COX)又被称为前列腺素合成酶,是花生四烯酸合成各种内源性前列腺素(PGs)过程中的限速酶,其催化产生的PGs参与了机体的多种生理及病理过程,如发热、炎症、出凝血机制等。目前发现有2个异构体COX-1和COX-2:COX-1起维持细胞的稳定性作用;COX-2是炎症部位诱导产生前列腺素(PGs)的酶,是“快速反应基因”。研究证实COX-2在人类肿瘤的发展过程中起重要作用。用COX-2 cDNA转染人结肠癌细胞,使转染细胞DNA合成明显增加,出现增殖效应,伴有EGFR表达上调,对细胞因子的敏感性增强。这从功能上证明COX-2有促进肿瘤增殖,抑制凋亡的作用。血管内皮细胞生长因子(VEGF)是1989年由Ferrara等在牛垂体滤泡星状细胞培养物中纯化分离到的一种肝素结合因子,人类VEGF基因位于染色体的6p21.3,全长28kb,由8个外显子和7个内含子构成,是一种同型二聚体,通过与血管内皮细胞上受体的结合,对血管内皮细胞发挥强烈的促分化作用和趋化作用,从而刺激血管生成。近年来,VEGF与恶性肿瘤的关系受到重视,开展了较多研究,发现恶性肿瘤组织VEGF表达上调,能促进肿瘤血管形成,是肿瘤产生、发展和转移过程中极为关键的步骤。本文就不同级别脑胶质瘤中VEGF、COX-2的表达情况,就VEGF和COX-2在脑胶质瘤的发生、发展中的作用及相互的关系进行研究,为探索脑胶质瘤的发生、发展提供理论依据。
方法:收集河北医科大学第一医院神经外科及中国石油天然气集团公司中心医院神经外科2003年-2008年手术切除的临床资料完整的胶质瘤病人。按照(1)患者均初次接受手术治疗;(2)病理组织学诊断明确;(3)患者术前均未接受放疗、化疗,进行入组,符合入选标准的45例脑胶质瘤患者存档石蜡标本。其中32例为初发胶质瘤,22例肿瘤在同一张切片上含有肿瘤边缘正常组织,10例为脑胶质瘤复发患者,其中3例患者有首次发病和复发肿瘤的石蜡标本。收集45例患者的临床资料,包括患者的年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤个数、肿瘤体积、病理类型及病理分级、是否复发等情况。按WHO神经系统肿瘤分类(2000版)标准,将肿瘤分为中低恶性灶(WHOⅠ、Ⅱ级);高度恶性(WHOⅢ、Ⅳ级);另外取22例颅内减压术的非肿瘤脑组织做为对照组。所有标本均经副高以上职称病理医生复查确诊。所有患者手术前没有接受过任何放疗及化疗。所有标本均经10%福尔马林固定,常规石蜡包埋。严格按照免疫组化的方法进行标记,利用光镜分析,采用双评分半定量法进行评分:光镜下随机观察10个高倍视野,记录6个高倍视野中染色阳性的百分率,记分标准:靶细胞阳性率0%为0分,1%~10%为1分,11%~50%为2分,51%~80%为3分,>80%为4分;显色度按切片中细胞显色有无进行评分,无显色为0分,浅棕黄色为1分,棕黄色为2分。①阴性组,两分相乘0分为(一);②弱阳性组,两分相乘1-2分为(+);⑧阳性组,两分相乘3-4分为(++);④强阳性组,两分相乘>4分为(+++)。将实验数据采用SPSS11.0统计软件进行统计学处理,P<0.05有统计学意义。包括:计量资料的比较采用t检验或单因素方差分析;计数资料的比较采用x2检验。
结果:45例脑胶质瘤患者,按WHO神经系统肿瘤分类(2000版)标准,由两名以上有经验的病理医师联合做出病理诊断,从肿瘤发生部位上看,10例累及顶叶,7例累及额叶,9例累及颞叶,4例累及枕叶,4例累及小脑,7例累及多叶,1例累及延髓,1例累及鞍区,1例累及侧脑室,1例累及三角区;从病理分型看,星形胶质细胞瘤26例,少突胶质细胞瘤3例,混合胶质瘤16例(主要为少突-星形胶质细胞瘤);按2000年WHO脑胶质瘤分类标准、中低恶性灶(WHOⅠ、Ⅱ级)胶质瘤21例,高度恶性(WHOⅢ、Ⅳ级)胶质瘤24例。COX-2阳性细胞主要分布在肿瘤实质中,以坏死区周围及血管密集的区域表达明显,阳性染色主要位于肿瘤细胞胞质,在一些血管内皮细胞上也偶有表达。45例胶质瘤组织中COX-2阳性表达率为62.22%(28/45),在正常脑组织中表达阴性,两者表达有统计学差异(P<0.01)。VEGF主要在胞质表达,阳性细胞分布范围与COX-2基本一致。45例胶质瘤标本中VEGF表达阳性率为68.89%(31/45),在正常脑组织中表达阳性率为18.18%(4/22),两者表达有统计学差异(P<0.01)。VEGF与COX-2在胶质瘤组织中的表达成正相关(P<0.01),表明VEGF的表达水平随COX-2表达水平的升高而升高;同时Kappa值分别为0.4643,表明VEGF与COX-2之间有较好的一致性。
结论:
1.COX-2在肿瘤的发生和进展过程中起作用;
2.COX-2可能是肿瘤形成过程中的早期分子事件,可作为监测肿瘤恶性进展的一个生物标志;
3.COX-2的表达与VEGF的表达有相关性。