【摘 要】
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目的:初步探讨盐酸安罗替尼（anlotinib hydrochloride,AL3818）、紫杉醇（paclitaxel,PTX）对舌癌Cal27细胞中免疫原性死亡相关分子CRT、HSP70、HMGB1、ATP表达的影响。方法:1.选取舌癌Cal27细胞作为研究对象,用CCK-8法检测AL3818、PTX的最佳作用浓度和作用时间;2.将细胞分为空白对照（Control）组、AL3818组、PTX组
【基金项目】
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四川省中医药管理局面上项目一项（编号:2021MS100）; 四川省科技项目重点研发项目（2018FZ0113）; 中国科学技术协会调研课题一项（编号:[2018]145）
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目的:初步探讨盐酸安罗替尼（anlotinib hydrochloride,AL3818）、紫杉醇（paclitaxel,PTX）对舌癌Cal27细胞中免疫原性死亡相关分子CRT、HSP70、HMGB1、ATP表达的影响。方法:1.选取舌癌Cal27细胞作为研究对象,用CCK-8法检测AL3818、PTX的最佳作用浓度和作用时间;2.将细胞分为空白对照（Control）组、AL3818组、PTX组、AL3818+PTX组;3.采用流式细胞术检测不同实验分组细胞凋亡情况;4.采用免疫荧光、流式细胞术检测CRT、HSP70在Cal27细胞中的表达;5.酶联免疫实验检测HMGB1在Cal27细胞上清液中的表达;6.ATP发光试剂盒检测ATP在Cal27细胞上清液中的表达;7.上述实验重复三次,并使用SPSS18.0软件对结果进行统计分析,结果以均数±标准差来表示,两组之间的比较,采用独立样本的t检验,多组之间的比较,采用单因素方差分析;当P＜0.05时,认为差异具有统计学意义。结果:1.CCK-8结果显示:AL3818、PTX作用Cal27细胞的最佳作用时间为24h,最佳作用浓度分别为6.254μmol/L、1.718μmol/L;2.流式细胞术结果显示:AL3818、PTX可诱导Cal27细胞凋亡,与Control组相比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）,AL3818+PTX组的凋亡率最高,与Control组、AL3818组、PTX组相比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）;3.免疫荧光、流式细胞术、酶联免疫实验、ATP发光试剂盒实验结果显示:AL3818、PTX可诱导Cal27细胞中CRT、HSP70、HMGB1、ATP的暴露,与Control组相比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）,AL3818+PTX组作用效果最佳,与Control组、AL3818组、PTX组相比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论:盐酸安罗替尼、紫杉醇可诱导舌癌发生免疫原性死亡,这一过程与免疫相关分子CRT、HSP70、HMGB1、ATP的暴露有关;盐酸安罗替尼联合紫杉醇对舌癌的免疫效果较盐酸安罗替尼、紫杉醇单独作用更佳。
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