顺铂和5-Fu作用于胃癌细胞株后糖酵解酶的变化

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caoshaohua2009
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目的:研究化疗药顺铂和5-Fu作用于胃癌细胞株MKN-45和SGC-7901后糖酵解途径中关键分子的特征性变化。方法:取处于对数生长期的SGC-7901和MKN-45胃癌细胞,常规胰酶消化后制成单细胞悬液,使细胞密度为5×103个/ml,将细胞接种于96孔板中,每孔90μl,培养21小时。将细胞分成实验组和空白对照组。采用MTT法观察在5-Fu、顺铂用药前后胃癌细胞株SGC-7901与MKN-45存活率的差异。之后再分别设置不加药对照组和分别加入不同浓度的5-氟尿嘧啶和顺铂的实验组,并用倒置相差显微镜观察药物作用后的细胞形态变化。同时应用Western Blotting方法观察化疗后细胞株SGC-7901和MKN-45中糖酵解途径中关键分子(pyruvate kinase PKLR,丙酮酸激酶,肝脏红细胞型;PKM2,丙酮酸激酶,肿瘤型;α-enolase,α-烯醇化酶;Aldolase A,醛缩酶和Heat shock protein 27,热休克蛋白27)含量的特征性变化。结果:(1)SGC-7901细胞株对5-FU和顺铂不敏感,生长抑制作用不明显。(2)MKN-45细胞株对5-FU不敏感但对顺铂敏感,生长抑制作用且呈剂量依赖性。(3)用顺铂干预后,在MKN-45细胞株中发现糖酵解途径中的关键分子(pyruvate kinase PKLR,丙酮酸激酶,肝脏红细胞型;PKM2,丙酮酸激酶,肿瘤型;α-enolase,α-烯醇化酶;AldolaseA,醛缩酶和Heat shock protein 27,热休克蛋白27)的表达量随顺铂剂量的增加而逐渐递减。(4)用5-Fu干预后,MKN-45细胞株中糖酵解途径中的关键分子没有明显的变化。(5)用顺铂和5-Fu分别干预后,SGC-7901细胞株中糖酵解途径中的关键分子的表达量反而略有递增趋势。结论:胃癌细胞株MKN-45对5-Fu和顺铂的敏感性不同,MKN-45细胞株对顺铂敏感,对5-Fu不敏感。而胃癌细胞株SGC-7901对顺铂和5-Fu均不敏感,并且有一定的耐药性。因此临床应用时应根据药物敏感性不同而谨慎用药。
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