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目的：随着人们生活方式的改变和人口老龄化，糖尿病的发病率正在急剧上升。糖尿病可以合并多种并发症，对糖尿病合并认知功能障碍的研究也越来越受到重视。氧化应激是糖尿病认知功能障碍发生、发展的重要机制。核因子E2相关因子2(Nuclear factor erythroid-2-related factor2，Nrf2)是抗氧化应激的核心转录因子。早期预防治疗糖尿病认知功能障碍，可以延缓和减少痴呆的发生，提高糖尿病患者的生活质量。故本文通过对Nrf2与糖尿病大鼠认知功能障碍关系的分析，探讨曲克芦丁早期干预对预防糖尿病认知功能障碍的依据。方法：1制备STZ糖尿病大鼠模型及分组：健康雄性（Sprague-Dawley, SD）大鼠40只（鼠龄6-8w），随机分为正常对照组（NC组，n=10只），糖尿病组（n=30只），糖尿病组大鼠空腹过夜后一次性腹腔注射链脲佐菌素60mg/kg，72h后于尾静脉测随机血糖，血糖≥16.7mmol/L视为造模成功。成模后将糖尿病组大鼠随机分为糖尿病对照组（DC组，n=15），糖尿病曲克芦丁干预组（DT组，n=15）。2干预：动物成模后，给予DT组腹腔注射曲克芦丁（60mg/kg）、DC组和NC组腹腔注射等量生理盐水每日注射1次，历时12周。3一般情况观察：观察并记录大鼠精神状态及进食、饮食、尿量等一般情况，检测并记录血糖、体重变化。4行为学检测：各组大鼠于成模12周后分别进行Morris水迷宫实验，包括前5天的定位航行实验以记录逃避潜伏期及第6天的空间探索实验以记录60s内穿越平台次数。5制备标本及观察指标：水迷宫实验结束的第二天，将大鼠处死，断头、取海马组织以测定超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase, SOD）活力、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）含量，用基因实时荧光定量-聚合酶链反应(R-T PCR）法检测Nrf2的mRNA水平以，用蛋白免疫印迹（Western-blot）法检测细胞Nrf2蛋白的表达，包括细胞内总蛋白和核内蛋白，用免疫组化法测定海马组织中Nrf2的表达水平。6统计学分析：通过SPSS19.0统计软件处理实验数据，采用完全随机设计的单因素方差分析，重复测量方差分析（逃避潜伏期数据）统计，使用重复测量数据多重比较配对的t检验法(Bonferroni法)，可进行每个分组每个时间点上作用的两两比较，使用多元方差分析的方法，可进行每个时间点上每个分组之间作用的两两比较。因数据符合正态分布（P＞0.1），故应用均数±标准差表示结果，应用P＜0.05表示差异有统计学意义。结果：1一般情况观察NC组大鼠血糖正常、体重稳定增长、皮毛光亮、反应灵敏等。DC组大鼠血糖明显升高（＞20.0mmol/L），具备糖尿病的典型症状如多尿、多饮、多食等，逐渐出现皮毛枯黄、生长缓慢、消瘦、反应迟钝等现象。干预过程中，DT组大鼠血糖升高（＞20.0mmol/L），消瘦情况与DC组相比差别无统计学意义，反应较DC组灵敏。2Morris水迷宫结果2.1基础游泳速度：各组大鼠游泳速度无统计学意义（P＞0.05）。2.2定位航行实验：各组间的区别：与NC组相比，DC组逃避潜伏期延长（P＜0.01），提示成模后12周，糖尿病大鼠出现认知功能障碍；与DC组相比，DT组逃避潜伏期缩短（P＜0.01），提示曲克芦丁干预12周后，可减轻认知功能障碍。第1天中NC组、DC组、DT组逃避潜伏期没有明显区别（P＞0.05）；第2到5天，与NC组相比，DC组大鼠逃避潜伏期均延长（P均＜0.01）；第2天，DC组与DT组逃避潜伏期没有明显区别（P＞0.05）；第3到5天，DT组逃避潜伏期较DC组大鼠逃避潜伏期明显缩短（P均＜0.01）。第5天与第1天逃避潜伏期的变化：NC组逃避潜伏期明显缩短（P＜0.01）；DC组逃避潜伏期无明显变化（P＞0.05）；DT组，逃避潜伏期缩短（P＜0.05），提示曲克芦丁干预12周后，可减轻认知功能障碍。2.3空间探索实验：与NC组相比，DC组、DT组大鼠穿越平台次数减少（P＜0.01）；与DC组相比，DT组大鼠穿越平台的次数增加（P＜0.01）。3海马组织HE染色结果NC组海马CA1区神经细胞形态正常，结构完整，排列整齐；DC组细胞排列紊乱，胞体缩小，胞质红色，正常形态神经细胞数量明显减少。DT组细胞形态正常，排列较整齐，结构较为完整。4免疫组化结果与NC组相比，DC组、DT组海马Nrf2阳性细胞的OD值均降低（P＜0.01）；DT组的Nrf2阳性细胞的OD值与DC组相比增高（P＜0.01）。5Rt-PCR结果与NC组相比，DC组、DT组海马Nrf2mRNA表达量均降低（P＜0.01）；DT组的Nrf2mRNA表达量均比DC组增高（P＜0.01）。6Western blot结果6.1细胞Nrf2总蛋白的表达：与NC组相比，DC组、DT组的Nrf2总蛋白表达量均降低（P＜0.01）；DT组的Nrf2总蛋白表达量与DC组相比增高（P＜0.01）。6.2细胞Nrf2核蛋白的表达：相对于NC组，DC组、DT组的Nrf2核蛋白表达量均降低（P＜0.01）；DT组的Nrf2核蛋白表达量与DC组相比增高（P＜0.01）。7SOD和MDA结果：SOD活力：DC组SOD活力弱于NC组（P＜0.05）；DT组与NC组无统计学差异（P＞0.05）；DT组与DC组相比增强（P＜0.05）。MDA含量：DC组的MDA含量高于NC组（P＜0.01）；DT组与NC组无统计学差异（P＞0.05）；DT组的MDA含量与DC组相比降低（P＜0.01）。结论：1认知功能障碍的STZ糖尿病大鼠其SOD活力减弱，MDA含量增加，且大鼠海马Nrf2表达下调。2预防性应用曲克芦丁可能通过上调STZ糖尿病大鼠海马Nrf2表达，提高其学习记忆能力，延缓糖尿病大鼠认知障碍的发生。