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目的:检测FOXM1( Forkhead box M1 )及MMP-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)在人胆囊癌组织中的表达情况;观察FOXM1基因沉默对人胆囊癌细胞株NOZ生物学行为的影响,初步探讨其在胆囊癌发生、发展中的作用。方法:采用免疫组化法检测51例胆囊癌及28例慢性胆囊炎(chronic cholecystitis, CC)组织中FOXM1和MMP-9的表达情况,并统计分析FOXM1、MMP-9的表达相关性,以及其表达与胆囊癌临床病理参数的关系;RT -PCR检测三株胆囊癌细胞株(GBC-SD、NOZ、SGC996)中FOXM1和MMP-9的表达情况,筛选出FOXM1和MMP-9均高表达的细胞株;针对FOXM1 mRNA序列设计合成siRNA的DNA模板,构建了4条PGPU6/GFP/Neo-FOXM1重组质粒,筛选出最强干扰效率的一条,并转染高表达FOXM1和MMP-9的胆囊癌细胞株NOZ;RT-PCR、Western blot技术检测FOXM1沉默对细胞内源性FOXM1表达的影响,RT-PCR和免疫细胞组化技术检测FOXM1沉默对NOZ细胞株内源性MMP-9表达的影响;用MTT法检测该细胞体外增殖活性的变化;用Transwell小室法检测该细胞体外侵袭能力的改变。结果: FOXM1、MMP-9在胆囊癌组织中的阳性率分别为52.9%和76.5%,而在慢性胆囊炎组织中的阳性率分别为10.7%和7.1%,胆囊癌组织与慢性胆囊炎组织比较两者均有显著性差异(P≤0.001)。FOXM1在胆囊癌组织中的表达与临床分期、分化程度、淋巴结转移相关( P =0.007、0.008、0.019),MMP-9在胆囊癌组织中的表达与临床分期、淋巴结转移相关( P =0.001、0.017)。FOXM1与MMP-9在癌组织中的表达有相关性(r =0.403, P=0.003)。RT-PCR结果显示FOXM1、MMP-9在胆囊癌细胞株GBC-SD、NOZ、SGC996均高表达,表达无统计学意义( P <0.05),选NOZ细胞株作为试验细胞株;PGPU6/GFP/Neo- FOXM1重组质粒在mRNA及蛋白水平分别显著抑制NOZ细胞FOXM1基因表达,抑制率分别最高达74.32%和82.18%,同时下调了MMP-9的表达;NOZ细胞增殖活性明显下降;侵袭细胞数下降至(31.4±4.037)个。结论: FOXM1和MMP-9在人胆囊癌组织中呈高表达,并与胆囊癌的临床病理参数密切相关,涉及胆囊癌的发生、发展;NOZ细胞FOXM1基因的沉默,使细胞的增殖活性和侵袭能力减弱,且可下调NOZ细胞内源性MMP-9的表达,FOXM1的促人胆囊癌侵袭转移能力可能与上调MMP-9的表达有关。