白木香叶中芒果苷的提取纯化研究

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目的:沉香来源于白木香(Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg.)含树脂木材,在国际上具有极高商业价值以及药用价值,作为中国重要的经济作物,现已在中国广西、云南、广东、海南等地进行大面积种植。白木香叶一年两生,产量较大,但常被丢弃以及焚烧,造成资源浪费。本文通过响应曲面法优化芒果苷最佳超声提取工艺,大孔树脂纯化白木香叶提取物中芒果苷含量,研究白木香叶芒果苷的提取纯化工艺,增加芒果苷单体物质来源,减少白木香叶的资源浪费,比较芒果苷与维生素C、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚抗氧化能力,为白木香叶工业开发与实验研究以及芒果苷作为食品类抗氧化剂开发研究提供依据。方法:1、方法学考察,测定白木香叶中芒果苷含量,通过单因素实验考察超声温度、提取时间、乙醇浓度、超声功率、料液比影响提取率最佳位置,选择提取时间、料液比、乙醇浓度进行Box-Behnken设计实验组合,响应曲面法建立数学模型进行拟合,预测最佳提取工艺。2、采用静态吸附解析法考察六种大孔树脂对芒果苷的吸附解析能力,对大孔树脂进行静态吸附-解吸动力学曲线,确定上样流速、柱床层高度以及乙醇洗脱浓度,进行工艺验证。3、采用体外清除DPPH自由基、ABTS+自由基、铜离子还原能力抗氧化实验,比较芒果苷与VC、BHT的抗氧化能力强弱。结果:1、单因素芒果苷超声提取时间为30min,超声频率为100kHz,料液比为15:1,温度为35℃,乙醇浓度为50%,经响应曲面法优化工艺为以58%乙醇,料液比16:1提取39min,预测响应值为1.78%,回归系数R~2为0.9577,调整系数Radj2为0.9032,按照响应面预算结果,经试验调整后实测值含量为1.78%;2、五种大孔树脂与AB-8对芒果苷的解吸吸附进行比较,差异具有统计意义(P<0.05),经试验结果显示AB-8对芒果苷的吸附平衡时间为120min,解吸时间为60min,上样流速2mL/min时,AB-8对芒果苷的平均吸附量为2.20g/mg,柱床层为25cm,AB-8的最佳吸附量为2.44g/mg,乙醇洗脱浓度为30%,经冷冻结晶后获得纯度为80%芒果苷;3、通过体外抗氧化实验结果显示,芒果苷VC以及BHT清除ABTS+·的IC50分别为 51.12±2.72、36.58±1.70、354.88±1.27μg/mL,清除 DPPH·的 IC50分别为:125.43±7.52、91.72±5.35、768.19±11.30 μg/mL,Cu2+还原能力的 IC50分别为 73.27±0.92、327±2.18、349.31±2.89μg/mL,三者物质都对着浓度的增加,自由基清除能力越强。结论:响应曲面法计算多项二次回归方程回归系数R~2为0.9577,Radj2为0.9032,说明该实验设计方法可以解释90.32%的模型,通过模拟工艺实验所测实际值与预测值相接近,说明响应曲面法优化芒果苷提取工艺可行可靠;经大孔树脂纯化后,提取物中芒果苷含量提高了 50%,经冷冻结晶后可得纯度为80%芒果苷粗品,因此结合响应曲面法优化最佳提取工艺与大孔树脂纯化工艺研究可以做为工业生产参考;从抗氧化实验结果可知芒果苷浓度越大,抗氧化活性越强,对DPPH·以及ABTS+·的清除率分别为VC的72%,73%,而铜离子还原能力强于VC,抗氧化能力均强于BHT,呈且未见有毒理实验报告,因此芒果苷可以作为抗氧化剂开发研究。
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