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目的:基底膜(basementmembrane,BM)是黏膜慢性炎症组织重塑的主要病理表现。本研究观察CRS筛窦黏膜BM厚度的变化,并以具有促进组织重塑作用的MMP—2和9作为研究对象,探讨MMP—2和9表达上调与BM增厚之间的关系,以及它们对疾病过程和结果的影响。
方法:
1.应用HE染色法观察CRSsNP和CRSwNP筛窦黏膜BM的厚度,统计学分析检测其与病程、症状评分(VAS)、术前Lund—MacKay评分(LM)、Lund—Kennedy评分和术中出血量等五个临床因素的关系,探讨BM增厚对上述临床因素的影响。
2.应用免疫组化法检测CRS筛窦黏膜和NP组织中MMP—2和9的表达及其阳染细胞的分布,用Western—Blot法和荧光定量RT—PCR分别检测MMP—2和9基因蛋白表达及定量表达,探索它们与BM增厚和术前、术后VAS评分的关系。
结果:
1.CRSsNP和CRSwNP筛窦黏膜BM均有不同程度增厚,与对照组比较差异有显著性(P<0.05),然而CRSsNP和CRSwNP之间BM厚度则无差异(P>0.05);无论CRSsNP或CRSwNP,病程越长,BM增厚越明显(P<0.05),同时,LM计分和术中出血量也随BM增厚而增多(P<0.05);但是,VAS评分则与BM厚度无关(P>0.05);Lund—Kennedy评分在CRSsNP,并不随BM增厚而增加,然在CRSwNP,则随BM的增厚而增高(P<0.05)。多次手术者的BM明显较初次手术者增厚(P<0.05),同样,多次手术者的术中出血量也明显多于初次手术者(P<0.05)。
2.免疫组化表明MMP—2和9在对照组未见表达,但在CRSsNP筛窦黏膜和CRSwNP息肉组织中则有表达,阳染细胞主要分布在上皮层(基底细胞附近)、腺体细胞、血管内皮和炎症细胞上,MMP—9在CRSwNP息肉组织的表达明显强于CRSsNP筛窦黏膜(P<0.05),而MMP—2在CRSsNP筛窦黏膜和CRSwNP息肉组织中的表达差异无显著性。
Western—Blot分析结果表明,MMP—2和9基因的蛋白在对照组均未检测到表达,MMP—9在CRSsNP筛窦黏膜和CRSwNP息肉组织中均有明显表达,而MMP—2在CRSsNP筛窦黏膜和CRSwNP息肉组织中均未检测到表达。MMP—9基因的蛋白表达在CRSsNP组和CRSwNP组与对照组比较差异均有显著性(P<0.05)。
荧光定量RT—PCR检测结果显示,MMP—2和9mRNA在CRSsNP筛窦黏膜、CRSwNP息肉组织和对照组均有表达。单因素方差分析表明,MMP—9mRNA表达量在CRSsNP组和CRSwNP组较对照组均有增高,与对照组差异均有统计学意义(P<0.05);但MMP—2mRNA表达量在CRSsNP组、CRSwNP组和对照组均无统计学意义。在CRSsNP组和CRSwNP组,MMP—9mRNA的表达量随着BM的增厚而升高,即2期BM的MMP—9mRNA表达量最高,1期BM者其次,0期BM者最低,三组间差异均有统计学意义(P<0.05)。
CRSsNP和CRSwNP的术前VAS得分均>5,术后鼻内镜随访6个月后两组的VAS评分明显降低(VAS<3),差异有统计学意义(P<0.001)。MMP—9mRNA表达量与术前和术后VAS得分呈正相关,术前MMP—9mRNA表达量较高者,术后VAS得分较高,预后相对差。
结论
1.BM增厚是CRS炎症鼻窦黏膜组织重塑的重要表现,BM增厚的程度在一定程度上反映疾病的严重程度(例如病程长、范围广、合并息肉和出血倾向)。
2.MMP—2和9在CRS筛窦黏膜和息肉组织中均有表达,其中MMP—9表达较强,组织中含量较高,且与BM厚度相关,提示MMP—9在CRS组织重塑中起主要作用。
3.MMP—9mRNA表达量与CRS术前和术后VAS得分呈负相关,提示MMP—9mRNA表达量与疾病的严重性有关,MMP—9mRNA表达量越高,VAS得分亦高,预后越差。