【摘 要】
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为建立中国棉铃虫核型多角体病毒(HaHPV)的基因筛选体系,该文探讨了聚合酶链反应介导构建罹病幼虫潜伏期cDNA文库的技术.以罹病棉铃虫幼虫为材料提取总RNA,反转录合成cDNA第
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为建立中国棉铃虫核型多角体病毒(HaHPV)的基因筛选体系,该文探讨了聚合酶链反应介导构建罹病幼虫潜伏期cDNA文库的技术.以罹病棉铃虫幼虫为材料提取总RNA,反转录合成cDNA第一链,加同聚dG尾,PCR扩增合成双链cDNA,再以pGEM-1为载体,通过T-A克隆构建重组质粒,转化DH5α大肠杆菌.经测定,文库大小为1.66×10<5>,重组率为87.8﹪;重组质粒的电泳检测和酶切分析表明,大部分重组子带有插入片段,其大小在0.3-1kb之间;重组质粒的杂交分析表明,该文库中病毒基因的cDNA克隆数为57.1﹪.
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