论文部分内容阅读
高原红细胞增多症(HAPC)是我国青藏高原地区的常见病与多发病,严重威胁着生活和工作在高原地区人们的身体健康。目前现代医学对于HAPC的治疗尚无有效方法,一般只能采用间断吸氧改善缺氧状态或采用高压氧舱缓解,重症患者需要及时移居海拔低处(平原)治疗。藏医学对于多血症(相当HAPC)的治疗具有独特的优势,藏医放血疗法将特定穴位病血从体内引出,而达到治疗HAPC目的。藏药三果汤散为藏医放血疗法治疗HAPC之前必服的分离汤,用于使病血液与正常血液分离,目前藏药三果汤散干预藏医放血疗法治疗HAPC的机制未见文献报道。目的采用代谢组学的方法,研究藏药三果汤散对HAPC大鼠模型及藏医多血症患者的干预作用,以阐释三果汤散干预藏医放血疗法治疗HAPC的作用机制。方法1、在模拟海拔5000m高原环境的低压舱中,使大鼠处于低氧环境40天(22h/d),建立HAPC大鼠模型,观察三果汤散干预HAPC大鼠的红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)等血常规指标。2、以HAPC大鼠模型为研究对象,采用ECF衍生血浆的GC-MS测定方法,结合主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)等化学计量学方法,确定血浆代谢图谱的内源性代谢物,并探索三果汤散干预HAPC模型大鼠的相关差异性代谢物。3、在西藏自治区藏医院采集HAPC患者血样15例(所有患者的血红蛋白浓度均达到HAPC的纳入标准：男性HGB≥210g/L,女性HGB≥190g/L),并对其进行血常规、血液流变学、血气分析检查。4、以HAPC患者为研究对象,采用ECF衍生血浆的GC-MS的方法,结合PCA、PLS-DA,分析HAPC患者血浆代谢图谱的内源性代谢物,并探讨藏医治疗放血前后的相关差异性代谢物。结果1、藏药三果汤散对于HAPC大鼠模型有一定的预防作用,血液的各项指标均有差异,对大鼠的血浆进行GC-MS代谢组学分析结果表明,通过PCA得分图,HAPC模型和三果汤散高剂量、三果汤散低剂量组、诺迪康胶囊组之间可以显著区分,经过对三果汤散干预HAPC大鼠内源性标志物鉴定,结果表明为9-己基-十七烷,甘氨酸,N-甲基-N-甲氧基羰基-乙酯、2,4-二叔丁基苯酚为主要生物标志物。2、对15例JHAPC患者临床实验的结果表明,HAPC患者血液中各项生化指标经治疗前后均有差异。经过藏医放血疗法治疗后,患者的头痛、紫绀有所缓解,血红蛋白浓度降低。采用PCA、PLS-DA统计方法处理结果表明,藏医放血疗法治疗HAPC患者前后的血浆PCA得分图均有分离趋势,其体内的内源性物质分别为2-乙基乙醇、1-哌啶羧酸乙酯、2-氯-辛烷、乳糖、油酸、Glycine, N,N’-1,2-ethanediylbis [N-(2-ethoxy-2-oxoethyl)-, diethyl ester、2,2’-亚甲基双-(4-甲基-6-叔丁基苯酚)、邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯、1-octylthio-1-deoxy-Galactopyranoside、Cholesta-3,5-diene。结论对HAPC大鼠和HAPC患者血液的各项指标检验结果表明,三果汤散以及藏医放血疗法对HAPC有一定的改善作用。采用代谢组学方法,揭示了三果汤散干预HAPC大鼠模型的内源性物质为甘氨酸，N-甲基-N-甲氧基羰基-乙酯等,三果汤散干预藏医放血疗法治疗HAPC患者的内源性物质为1-哌啶羧酸乙酯等。