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目的:茯苓属于大宗常用药食两用类中药材,具有利水渗湿,健脾,宁心等功效。目前,茯苓广泛应用于药品、食品、保健品中,市场前景广阔。近年来,有关中药和化学药物相互作用而降低疗效和导致毒副反应的报道日益增多,已引起人们的广泛关注。细胞色素P450酶是在药物代谢环节起关键作用的I相代谢酶,在中药配伍及中西药间的联合应用中有着重要的意义。本研究旨在从酶活性水平和m RNA表达水平考察茯苓对大鼠Cyp1a2、Cyp2b1、Cyp2c6、Cyp2c11、Cyp2e1和Cyp3a1酶的影响,以期为茯苓与其他西药或中药联合应用提供参考,并为研究复方中茯苓配伍机制奠定基础。方法:首先,对茯苓提取物中水溶性成分茯苓总多糖、醇溶性成分总三萜及总三萜中主要4种三萜酸进行含量测定;其次,建立LC-MS/MS方法测定大鼠体内6种主要代谢酶(Cyp1a2、Cyp2b1、Cyp2c6、Cyp2c11、Cyp2e1和Cyp3a1)相应探针底物(非那西丁、安非他酮、双氯芬酸钠、奥美拉唑、氯唑沙宗、咪达唑仑)的生物样品分析方法;将48只SD雄性大鼠随机平均分为8组:生理盐水组、茯苓水提物低、中、高剂量组(1,2,4g/kg),0.5%CMC-Na组、茯苓醇提物低、中、高剂量组(1,2,4g/kg),连续灌胃14天,于最后一天给药之后,各组大鼠分别尾静脉注射探针药物混合溶液,于预设时间点眼底静脉丛采血,LC-MS/MS方法测定不同组大鼠血浆中6种探针底物的血药浓度,并用DAS2.0软件计算各组探针底物的主要药代动力学参数,进行统计学分析,考察茯苓提取物对大鼠Cyp450酶活性的影响;同时,另取48只SD雄性大鼠随机平均分为8组,在连续灌胃14天后,于最后一天将大鼠颈椎脱臼处死,取肝组织,用荧光定量PCR测定各组中主要细胞色素P450酶亚型的m RNA相对表达水平,分析茯苓提取物对大鼠体内该6种Cyp450酶的基因表达水平是否有影响。结果:500.0g茯苓经水提煎煮浓缩至50m L浸膏后茯苓总多糖的含量为0.20g/m L,500.0g茯苓经95%乙醇回流、浓缩、干燥后得粉末2.02g,该粉末中茯苓总三萜含量为95.30%,其中去氢茯苓酸、去氢土莫酸、茯苓酸、松苓新酸的含量分别为9.60%、4.80%、12.40%、0.41%;建立了一种LC-MS/MS测定大鼠体内6种探针底物非那西丁、安非他酮、双氯芬酸钠、奥美拉唑、氯唑沙宗、咪达唑仑的血浆样品分析方法,经方法学考察后可行;茯苓对大鼠体内细胞色素P450的酶活性及m RNA表达结果相一致,即(1)茯苓水提物、醇提物均能显著提高Cyp2b1、Cyp2c6、Cyp3a1的酶活性及上调其m RNA表达;(2)茯苓水提物能提高Cyp1a2的酶活性及m RNA表达水平,而茯苓醇提物对Cyp1a2的酶活性及m RNA表达水平则无影响;(3)茯苓醇提物能提高Cyp2e1的酶活性及上调其m RNA表达水平,而茯苓水提物对Cyp2e1的酶活性及m RNA表达水平则无影响;(4)茯苓水提物、醇提物均对Cyp2c11的酶活性及m RNA表达水平无显著影响。结论:茯苓对大鼠Cyp450酶活性及m RNA表达的影响具有一定的选择性,且与给药组分、给药剂量有关,除Cyp2c11外,茯苓对Cyp1a2、Cyp2b1、Cyp2c6、Cyp2e1和Cyp3a1酶均呈现不同程度的诱导作用,这提示当茯苓与经该类酶代谢的药物联合使用时,应充分考虑可能存在的潜在相互作用,同时,茯苓对该类酶的诱导与茯苓的复方配伍机制是否相关值得进一步研究。