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目的将外源性PDCD4导入食管癌Eca109细胞系,通过与空载体转染细胞及未转染细胞作对照,研究PDCD4对食管癌细胞的形态、生长增殖以及凋亡的影响,为实验研究及临床基因治疗提供实验依据。方法1.用空载体或PDCD4重组表达载体转染食管癌Eca109细胞系,并用荧光定量PCR和Western blot方法检测转染后PDCD4在食管癌细胞系中的表达。2.通过显微镜观察PDCD4转染前后食管癌Eca109细胞系的生长分化及形态学变化。3.转染48小时后,通过显微镜对三组食管癌Eca109细胞进行计数对照,分析PDCD4转染对细胞生长增殖的影响。4.通过流式细胞术分析比较三组食管癌Eca109细胞的凋亡情况。结果1. PDCD4基因成功转染食管癌Eca109细胞并稳定表达。荧光显微镜下,转染PDCD4重组表达载体组及转染空载体组的食管癌Eca109细胞可看到绿色荧光,而未转染组的食管癌Eca109细胞无荧光。通过荧光定量PCR及Western blot方法检测到PDCD4mRNA及PDCD4蛋白在转染PDCD4重组表达载体的细胞中高表达,说明PDCD4基因成功转染食管癌Eca109细胞并稳定表达。2. PDCD4能够使食管癌Eca109细胞形态发生改变。未转染组及转染空载体组的食管癌Eca109细胞生长均良好,形态均正常,而转染PDCD4重组表达载体组的食管癌Eca109细胞,数量和形态均发生明显的变化,细胞变圆,萎缩,甚至有部分细胞已经死亡脱落。3. PDCD4的表达对食管癌Eca109细胞的生长及细胞数目有明显的影响。PDCD4表达载体转染的Eca109细胞计数为(5.02±0.29)×105,明显少于未转染组Eca109细胞计数(7.67±0.44)×105,差异有显著性(P<0.05)；明显少于转染空载体组细胞计数(6.81±0.33)×105,差异有显著性(P<0.05)。而未转染组细胞计数与空载体转染组细胞计数差异无统计学意义(P>0.05)。4. PDCD4的表达可以促进食管癌Eca1 09细胞的凋亡。转染PDCD4重组表达载体组的Eca109细胞凋亡率(38.07-%-1.08%)明显高于未转染组Eca109细胞的凋亡率(19.57%±2.6%),差异有统计学意义(P<0.05)；另外,转染PDCD4重组表达载体组的Eca109细胞凋亡率明显高于转染空载体组的Eca109细胞凋亡率(26.9%±0.61%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论1. PDCD4在食管癌Eca109细胞中成功转染并稳定表达。2. PDCD4转染食管癌Eca109细胞并稳定表达后,细胞的生长和增殖受到抑制,表明PDCD4可以抑制食管癌Eca109细胞的生长。3. PDCD4在食管癌Eca109细胞稳定表达后可以促进细胞的凋亡,表明促进细胞凋亡可能为PDCD4的一个抑癌机制。