盐碱胁迫条件对栅藻SP-01中抗氧化酶活性和代谢产物积累的影响

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本研究工作是在从广州流花湖中分离出来的一株具有较高耐盐碱性的栅藻SP-01的基础上,采用形态学和分子生物学方法对该藻进行了进一步的分类学鉴定。对不同浓度NaCl、NaHCO3和pH水平对该藻的生长、抗氧化酶、类胡萝卜素和脂肪酸等代谢产物的影响进行了深入研究,并探讨在不同盐碱胁迫条件下藻细胞抗氧化酶与代谢产物的变化规律。研究结果如下:1.通过光学显微镜和透射电子显微镜观察显示,SP-01细胞多为卵圆形,细胞壁表面光滑、无鞭毛,有细胞核,周生杯状叶绿体,光合色素含叶绿素a和叶绿素b,具多个淀粉粒和1个蛋白核。这些特征符合绿球藻门绿球藻目藻类的一般形态学特征。此外,通过18S rDNA序列同源性比较和系统发育分析,从分子生物学的角度分析结果来看,初步鉴定SP-01属于绿球藻门绿球藻目栅藻科栅藻属。但SP-01营单细胞生活,这与一般的栅藻属细胞联合成双或成行排列,组成真性定形群体的生活方式有所不同,该藻很有可能是一新种,但还有待进一步的研究证实。2.NaCl浓度在0-0.10mol/L范围内对SP-01的生长没有显著的影响(p>0.05),当NaCl浓度在0.01mol/L时获得最大藻细胞干重0.73g/L,表明低盐胁迫对SP-01的生长有促进作用。但当NaCl浓度高于0.10mol/L时藻细胞干重开始出现明显下降,并在NaCl浓度为0.60mol/L时达到最低值0.21g/L。SP-01可以在0.05-0.10mol/L的NaHCO3浓度下保持良好的生长状态(p>0.05),并在NaHCO3浓度为0.05mol/L时具有最大藻细胞干重0.84g/L,说明弱碱胁迫对SP-01的生长有良好的促进作用。但当NaHCO3浓度高于0.10mol/L时SP-01的细胞干重出现明显下降,并随着NaHCO3浓度的增加而进一步下降。实验结果还表明,SP-01可以耐受高碱性环境,在培养基初始pH11.5时仍可保持较好的生长,在初始pH7.5到10.5范围内SP-01生长没有出现显著性差异(p>0.05),其细胞干重在0.60-0.69g/L之间波动。3.SP-01中的抗氧化酶SOD和CAT活性对于盐碱胁迫所表现出来的变化趋势一致,在低盐或弱碱胁迫下抗氧化酶活性随着胁迫程度的增加而下降,然而随着盐碱胁迫程度的进一步加强,抗氧化酶活性又表现出逐渐上升的趋势,并且不同的胁迫条件对抗氧化酶活性有显著性影响(p<0.05)。而类胡萝卜素含量对于胁迫环境的反应正好与抗氧化酶相反,它们随着胁迫程度的增加表现出先上升后下降的趋势,二者具有明显的负相关性,即当抗氧化酶活性最高的时候,类胡萝卜素含量最低。4.实验结果发现总脂肪酸含量与SP-01的生长保持正相关性,随着SP-01生物量的积累而增长,随SP-01生物量的下降而减少,且C18:1占总脂肪酸35%-47%之间。在NaCl浓度为0.10mol/L时总脂肪酸含量最高,达到266mg/g,其中C18:1占总脂肪酸含量47%。
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