一种反式调控植物表达系统的建立

来源 :中国科学院遗传学研究所 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuan398699360
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提高外源基因在植物中的表达是植物基因工程一个重要的研究方向.反式作用因了可以增强启动了表达的活性.因此,利用反式作用因子提高外源基因的表达是很有意义的研究课题.前期工作表示,来自于烟草的反式作用因子TGAla,可与CaMV35S启动子中的as-1序列相互作用.这处相互作用可在体外转录系统中有效地增加转录超始复合物的数目.因此,TGAla有可能增强35S启动子下游外源基因的表达.在该实验中构建了含有韧皮部物特异表达启动了rolC控制下的TGAla基因的载体.用这个载体和另一个可表达GaMV35S启动子控制下的报告基因GUS的载体一起共转化烟草.用GUS组织化学染色法分析时,发现受TGAla调节的35S启动子下的GUS蛋白的表达比调节的35S启动子下的GUS蛋白表达水平为对照的2.8倍.上述结果表明,TGAla的表达有效地增强了35S启动子控制下的GUS基因的表达.利用这个新型的表达调控系统,构建了在植物韧皮部特异性表达抗虫蛋白-雪花莲外源凝集素(GNA)-的载体,以期抗虫物质GNA能在韧皮部增强表达.利用反式作用因子来提高外源基因的植物组织内的表达,目前尚示见有文献报导类似工作.
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