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戊烷硒啉(简称WB硒啉药物)是我们实验室新合成的乙烷硒啉系列药物。乙烷硒啉(ethaselen,BBSKE,临床Ⅱ期)是一种新型硫氧还蛋白还原酶抑制剂,前期研究发现BBSKE能够靶向抑制硫氧还蛋白还原酶的活性,抑制多种肿瘤细胞生长,诱导肿瘤细胞凋亡,并且具有一定的免疫调节活性。戊烷硒啉作为乙烷硒啉的系列药物之一,研究发现:戊烷硒啉对肺癌细胞A549,口腔咽喉癌细胞Acc-m,肝癌细胞HepG-2细胞具有显著的生长抑制作用;其抑制肿瘤细胞生长增殖,诱导凋亡的过程,可能是通过抑制硫氧还蛋白还原酶活性这一途径来实现;此外,肿瘤细胞内的活性氧自由基也发现起着一定的作用。本研究还对戊烷硒啉对非小细胞型肺癌A549,高转移型涎腺腺样囊癌Acc-m细胞,肝癌HepG-2细胞的影响的作用机制进行了一定的研究,得出了一些科学的结论。
研究主要采用的方法,四甲基噻唑蓝(MTT)比色法测定戊烷硒啉对多种人体肿瘤细胞生长增殖抑制作用;DTNB法测戊烷硒啉对体外和肿瘤细胞内硫氧还蛋白还原酶活性的影响;Western Blot测戊烷硒啉对HepG-2肝癌细胞内硫氧还蛋白还原酶蛋白含量水平的影响;流式细胞仪测定戊烷硒啉对A549肺癌细胞和涎腺癌细胞Acc-m细胞周期阻滞的影响;DCFH-DA法测戊烷硒啉对A549细胞和Acc-m细胞内活性氧自由基水平的影响。
主要研究结论:戊烷硒啉对肺癌细胞A549,口腔咽喉癌细胞Acc-m,肝癌细胞HepG-2细胞具有一定的生长抑制作用;作用机制可能为:使肿瘤细胞停滞在G1期,能观察到细胞毒作用具有相应的时间梯度一致性和剂量梯度一致性;不同剂量的戊烷硒啉硒啉干预后,TrxR活性被不同程度地抑制;Western Blot半定量分析细胞内硫氧还蛋白还原酶含量,发现酶含量无显著性变化,我们推断戊烷硒啉可能是通过抑制硫氧还蛋白还原酶的活性,而不是通过降低胞内酶含量来降低细胞内酶活性;一定量的戊烷硒啉作用肿瘤细胞后,细胞内活性氧自由基水平都呈现显著性的增高,并且这种变化与肿瘤细胞的生长抑制程度呈一致性。
为更好地研究口腔癌治疗中的多药耐药机制,同时为弥补本实验室肿瘤药物筛选细胞平台不足。建立耐顺铂涎腺腺样囊性癌细胞系Acc-m/DDP细胞,方法:采用间歇诱导法。