禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽类烈性传染病，高致病性禽流感已被世界动物卫生组织(OIE)列为急烈性传染病，近些年低致病性禽流感也大范围流行，尤其是H9亚型禽流感不仅给养禽业带来重大的经济损失，而且开始威胁人类健康。基于该背景，本研究构建了H9亚型禽流感病毒HA基因重组禽病毒，为进一步防治禽流感打下基础。　　 根据Genbank上发表的H9亚型禽流感病毒HA基因序列，设计并合成一对特异性引物，利用RT-PCR技术扩增17株山东省内不同地区宿主来源的H9亚型的禽流感病毒的HA基因，将获得的目的基因分别克隆到pMD18-T simple vector上，筛选阳性克隆进行序列分析。结果表明:获得的目的基因片段序列分别与标准株序列相符，可以用于下一步构建重组鸡痘病毒转移载体的试验。　　 构建H9亚型禽流感病毒HA基因禽痘病毒转移载体，经转染、蓝斑克隆、筛选和纯化，获得了遗传性状稳定的HA基因重组禽痘病毒。提取感染重组病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)的DNA进行PCR扩增，获得1.7kb的携带有外源目的基因的片段。收集纯化的重组病毒CEF细胞，用H9亚型AIV多克隆血清作一抗，碱性磷酸酶标记的鸡IgG为二抗进行Western blot检测，结果表明重组痘病毒能在体外的CEF细胞表达HA糖蛋白。