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目的:考察参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠学习记忆功能、海马病理、海马星形胶质细胞的影响,并从JAK2/STAT3信号通路调控星形胶质细胞的角度探讨参芪益智颗粒抗痴呆作用的分子机制,为其临床应用和开发奠定药理学基础。实验方法:1.模型构建及动物分组干预采用Aβ1-42双侧海马注射法建立AD大鼠模型,造模一个月时采用Morris水迷宫定向航行实验筛选存在认知障碍的大鼠用于后续研究。造模成功的大鼠随机分组5组,即模型对照组、安理申组、参芪益智颗粒高、中、低剂量组,每组10只,另取10只假手术大鼠作为空白对照组,各组大鼠连续灌胃给予相应的药物60天,模型对照组和假手术组给与等体积的生理盐水。2.参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠学习记忆功能的影响采用Morris水迷宫实验,考察参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠学习记忆功能的影响;采用HE染色法考察参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD模型大鼠海马病理形态的影响。3.参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠星形胶质细胞的影响采用免疫组化法考察参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠海马星形胶质细胞数量及细胞足突的影响;采用化学试剂法考察参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠脑组织谷氨酸含量和谷氨酰胺合成酶活性的影响。4.参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠脑JAK2/STAT3信号机制的影响采用Elisa试剂盒检测Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠脑组织IL-6的表达;采用qRT-PCR法检测Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠海马JAK2/STAT3信号通路中JAK2 mRNA和STAT3 mRNA的表达水平;采用Western blot法检测JAK2蛋白磷酸化水平、STAT3蛋白磷酸化水平。实验结果:1.参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠学习记忆功能的影响定向航行实验结果表明,与假手术组比较,模型对照组大鼠逃避潜伏期明显延长（P<0.05）;与模型对照组相比,参芪益智颗粒各组大鼠的逃避潜伏期显著下降（P<0.05）。空间探索实验结果表明,与假手术组比较,模型对照组大鼠穿越平台次数显著减少（P<0.05）,进入平台象限时间百分比显著降低（P<0.01）,进入平台对角象限时间百分比显著增加（P<0.01）;与模型对照组比较,参芪益智颗粒各组大鼠穿越平台次数明显增加（P<0.05）,进入平台象限时间百分比也显著增加（P<0.05）,进入平台对角象限时间百分比显著下降（P<0.05）。2.参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠海马组织病理形态的影响与假手术组比较,模型对照组大鼠海马CA3区锥体细胞排列明显紊乱（P<0.05）,神经元出现明显的坏死、空泡化现象,并伴有明显的胶质细胞增生（P<0.01）。与模型对照组相比,参芪益智颗粒组大鼠海马CA3区上述病理损伤均明显改善（P<0.05）。3.参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠星形胶质细胞异常的影响与假手术组相比,模型对照组大鼠海马CA3区星形胶质细胞过度增生明显,其特异性标志物GFAP表达显著增加（P<0.01）,细胞足突显著增长（P<0.01）。与模型对照组相比,参芪益智颗粒组大鼠海马CA3区GFAP表达显著下降（P<0.05）,细胞足突明显缩短（P<0.01）。与假手术组相比,模型对照组大鼠脑组织谷氨酸含量显著升高（P<0.01）,谷氨酰胺合成酶活性虽然下降,但无显著统计学差异（P>0.05）。与模型对照组比较,参芪益智颗粒组大鼠脑组织谷氨酸含量明显下降,差异具有统计学意义（P<0.01）;参芪益智中剂量组和低剂量组谷氨酰胺合成酶活性显著增强,差异具有统计学意义（P<0.05）。4.参芪益智颗粒对Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠脑JAK2/STAT3信号通路的影响与假手术组比较,模型对照组大鼠脑组织IL-6表达有升高趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）。与模型对照组比较,参芪益智颗粒组大鼠脑组织IL-6表达虽有降低趋势,但差异无统计学意义（P>0.05）。在基因表达层面,与假手术组比较,模型对照组大鼠海马JAK2 mRNA和STAT3 mRNA相对表达显著增强（P<0.01）。与模型对照组相比,参芪益智颗粒组大鼠海马JAK2 mRNA和STAT3 mRNA相对表达显著降低（P<0.01）。在蛋白表达层面,与假手术组比较,模型对照组大鼠海马JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平显著升高,差异具有统计学意义（P<0.05）。与模型对照组比较,参芪益智颗粒组大鼠海马JAK2、STAT3蛋白磷酸化水平明显下降,差异具有统计学意义（P<0.05）。实验结论:参芪益智颗粒能够改善Aβ1-42双侧海马注射AD大鼠学习记忆功能及海马病理形态变化,抑制星形胶质细胞过度增生和/或活化,对JAK2/STAT3信号通路关键靶点基因和蛋白的表达有明显的抑制作用。提示通过拮抗JAK2/STAT3信号通路活化进而抑制星形胶质细胞的异常增生或/和活化是参芪益智颗粒抗AD作用的机制之一。