BADH、NP-1双价基因表达载体构建和杨树遗传转化研究

来源 :南京林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weiqiwin
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该研究以具有抗细菌、真菌、病毒、恶性肿瘤能力、抗性谱最为广泛且不易被产生抗性的兔防御素基因NP-1和从盐生植物山菠菜中克隆的酶活性极强的甜菜碱醛脱氢酶AhBDH为外源的目的基因,成功地构建了双基因植物表达载体pBin35SBADH-NP1,这是首次尝试将生物抗逆性基因和非生物抗逆性基因构建在同一个植物表达载体上,为开展有关方面的研究奠定了基础.以NL-80106杨(Populusdeltoides×P.simonii)为转化受体,摸索出了该基因以根癌农杆菌菌杆LBA4404为介导的遗传转化优化条件,并获得了一批mk芽.该研究以AGL1(pBIUbiCMO)为基础,构建了适宜在双子叶植物中转化的山菠茯CMO基因的双元植物表达载体pBI35SCMO,同时将pBIUbiCMO和pBI35SCMO两种表达载体转化到了相同的农杆菌菌株LBA4404和AGL1之中,为实现AhCMO基因和AhBADH基因在双子叶植物中的共转化、比较AhBADH基因在不同启动子(Ubi和35S)驱动下在木本植物中的表达差异、比较不同农杆菌菌株(LBA4404和AGL1)介导转化同一种植物时对转化频率的影响等奠定了基础.摸索出了CMO基因两种转化载体由不同农杆菌菌株介导转化NL-80106杨和烟草的遗传转化再生条件,并获得了一批km芽.摸索出了农杆菌菌株AGL1介导AhBADH基因转化NL-80106杨的优化条件,共获得88株km植株.
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