诸葛菜(Orvchophragmus violaceus)EPSP合成酶基因的克隆与分析

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原核生物、酵母、真菌、顶配位寄生虫、植物和藻类中的EPSP合成酶是莽草酸途径中的一个氨基酸必需酶.芳香言辞氨基酸苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸和其它一些必需代谢物如泛醌、维生素K2类、维生素K的起始物是莽草酸途径所产生的分枝酸.EPSP合成酶可逆地催化莽草酸-3-磷酸和磷酸烯醇式丙酮酸缩合成EPSP和无机磷.根据同源比较其它高等植物中EPSP合成酶基因,找出该基因的保守序列并设计一对寡核苷酸引物,以诸葛菜的总DNA为模板进行PCR反应,克隆出了两个EPSPS基因的片段,其中一条长为797bp,另一条1157bp,它们在GenBank的登录号为:AF440390、AF440391.利用克隆到的该基因的mRNA及真核生物核基因内含子的特征序列5GT-AG 3分析出这两个片段内含子和外显子,并推导出它们所编码的氨基酸序列.
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