红边豆瓣绿(Peperomia tetraphylla(Forst.F.)Hook.et Atm.))叶质肥厚,如玉似碧,花朵清新宜人,是流行的小型盆栽花卉。本试验以红边豆瓣绿无菌试管苗叶片为外植体,优化试管苗成活率。从不同浓度外源激素配比、培养基浓度、碳源、摇床转速、连续培养时间等方面开展红边豆瓣绿体细胞胚悬浮培养研究。同时研究试管苗气生根培养环境、愈伤组织细胞学观察等方面,抑制气生根形成,通过移栽驯化提高试管苗成活率,为后期红边豆瓣绿细胞工程及生产应用提供科学依据。本试验主要研究结果如下:1.红边豆瓣绿胚性细胞悬浮培养(1)红边豆瓣绿最佳胚性愈伤组织培养基配方:MS培养基上添加6g/L琼脂、30g/L蔗糖、1.0 mg/L6-BA、1.0mg/L2,4-D外源激素,诱导率71.1%,形成质地疏松的绿色愈伤组织;胚性细胞团形成及增殖培养基配方:MS液体培养基上添加30g/L蔗糖,0.5 mg/LNAA和1.0 mg/L6-BA,胚性细胞团诱导率66.12%。(2)组织细胞团悬浮培养过程,液体培养基中初始接种0.4 g组织细胞,细胞鲜重为2.1g,增殖速率最大。添加30g/L蔗糖为红边豆瓣绿胚性细胞增殖最佳碳源,细胞鲜重至1.56g。连续培养42d细胞增殖量最大,细胞团生长良好,鲜重为1.67g。摇床转速为110r/min,细胞团增殖效果最佳。(3)红边豆瓣绿细胞团分化及植株再生过程最适培养基浓度为1/2 MS。体细胞胚分化,植株再生最佳分化培养基为MS+1.0m/L6-BA+0.3 mg/L ImA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂。(4)红边豆瓣绿体细胞胚发生过程与其他种类植物体细胞胚形成过程相似。经历似小圆球状胚、似椭圆状胚、似心形胚、子叶形胚、成熟胚阶段。2.红边豆瓣绿试管苗气生根抑制(1)红边豆瓣绿气生根抑制过程,1/2MS浓度添加30g蔗糖、5g琼脂、0.1mg/LNAA、0.5mg/L 6-BA的培养基上,气生根数量最少。6-BA、NAA对红边豆瓣绿气生根抑制起主要作用。(2)NAA、IAA、I-BA三种生长素,NAA抑制气生根效果最佳,I-BA效果次之,IAA效果最差,添加0.3 mg/L NAA的培养基上气生根量最少。(3)红边豆瓣绿培养基上支撑物质浓度为1/4MS,抑制气生根形成。培养基上添加2g珍珠岩,形成气生根数量最少。植株连续培养在2g珍珠岩+0.3 mg/LNAA+0.5 mg/L6-BA+30g/L蔗糖+5g琼脂的培养基上35～42 d,形成气生根数量最少。(4)红边豆瓣绿诱导胚性愈伤组织过程,部分愈伤组织脱分化形成大量气生根。添加2,4-D 0.5 mg/L+6-BA0.5mg/L的MS培养基上,形成黄绿色胚性愈伤组织分化形成体细胞胚,再分化形成完整植株,抑制气生根形成。(5)红边豆瓣绿移栽浇水6d效果最佳,气生根数量越少的红边豆瓣绿成活率越高。以蛭石:珍珠岩:草炭=1:1:2为试管苗移栽基质,红边豆瓣绿移栽植株生长健壮。