血液灌流对急性百草枯中毒兔肾损伤的干预研究

来源 :温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yp0202
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目的:  研究血液灌流技术(Hemoperfusion,HP)对百草枯(Paraquat,PQ)中毒兔肾损伤的干预作用及机制。  方法:  1.将60只普通级雄性日本大耳白兔随机分为4组,正常对照组(6只,生理盐水灌胃),空白对照组(18只,生理盐水灌胃后1小时给予治疗2小时),PQ染毒组(18只,20%PQ溶液50mg/kg灌胃),HP治疗组(18只,百草枯灌胃后1小时给予HP治疗2小时)。后三组兔分为3个观察时间小组(1、3、7天),每组6只。经不同处理后,正常对照组于第1天,后三组分别于第1、3、7天,耳缘静脉取血,离心后取上清,麻醉处死,并留取肾组织,-80℃保存。  2.观察不同处理组兔的行为学方面的变化。  3.观察不同处理组兔肾组织的病理学改变。  4.化学比色法检测血浆Scr和BUN,观察不同处理组兔肾功能指标的变化。  5.化学比色法检测肾组织匀浆SOD、GSH-px活力和MDA含量的变化,双抗夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测HO-1、iNOS的含量,观察兔肾组织的氧化损伤情况。  6.ELISA检测TNF-α、IL-6水平变化,逆转录-聚合酶链式反应法(RT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)分别检测核转录因子NF-κB基因和蛋白的表达水平,观察兔肾组织的炎症损伤情况。  结果:  1.正常对照组和空白对照组兔行为学未见异常表现。PQ染毒组兔于染毒后立刻出现中毒表现,中毒第3天表现最为严重,之后逐渐好转。在第1、3、7天HP治疗组行为学表现较PQ染毒组轻。  2.光镜下观察,正常对照组和空白对照组兔肾脏病理切片未见异常表现。PQ染毒组兔肾组织病理损害在染毒后第3天最严重,在第1、3、7天,HP治疗组肾脏病理损害较PQ染毒组轻。  3.与正常对照组相比,空白对照组血浆Scr、BUN无明显变化,PQ染毒组血浆Scr、BUN在第1、3、7天明显升高(P<0.05)。与PQ染毒组相比,HP治疗组血浆Scr、BUN在第1、3、7天显著下降(P<0.05)  4.与正常对照组相比,空白对照组MDA、SOD、GSH-px、HO-1、iNOS无显著差异(P>0.05);PQ染毒组在第1、3、7天MDA含量、HO-1、iNOS活力均显著升高(P<0.05),SOD、GSH-px活力显著降低(P<0.05)。与同时间点PQ染毒组相比,HP治疗组在第1、3、7天MDA含量,HO-1活力降低,SOD、GSH-px活力升高(P<0.05),iNOS活力在第1天无差异(P>0.05),而在第3、7天显著降低(P<0.05)。  5.与正常对照组相比,空白对照组TNF-α、IL-6、NF-κB蛋白和NF-κB基因表达无显著差异(P>0.05);PQ染毒组在各个时间点TNF-α、IL-6、NF-κB蛋白和NF-κB基因表达显著升高(P<0.05)。与同时间点PQ染毒组比较,HP治疗组在第1、3、7天TNF-α、IL-6、NF-κB蛋白和NF-κB基因表达显著降低(P<0.05)。  结论:  PQ中毒可导致兔肾脏氧化/抗氧化系统失衡,进一步导致肾脏氧化损伤,同时促进肾脏炎症因子的产生。HP可显著提高兔肾脏对PQ毒性的抵抗能力,对PQ中毒所致的兔肾脏损伤具有保护作用。
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