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背景人乳头瘤病毒(human papillomavirus HPV)是一种DNA病毒,具有很强的嗜鳞状上皮的特性。被公认的HPV亚型至少有130种,根据其致癌作用,分为低危型型和高危型。低危型常引起皮肤、外生殖器湿疣等良性病变;高危型与宫颈癌、肛门癌、头颈部肿瘤、食管癌、肺癌等发生相关。众所周知,高危型HPV是宫颈癌的病因。1979年,Syrj?nen首次提出HPV与支气管肺癌之间可能存在一定联系。近30年世界各地采用不同方法对HPV与肺癌相关性进行研究。但迄今为止,不同区域不同研究报道HPV在肺癌中的感染率及组织学类型相关性差异较大。目前HPV在肺癌中的致癌机制并未完全清楚,有待于更多的研究进行证实。目的1.探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer NSCLC)与HPV感染相关性;2.了解高危型HPV16/18在NSCLC中感染情况;3.分析HPV感染与多种基因突变状态相关性,预测HPV在NSCLC发病过程中可能的致癌机制。方法1.收集NSCLC 264例原发灶和65例转移灶的石蜡包埋组织标本(formalin-fixed paraffin-embedded FFPE)为研究对象。原发灶邻近的上皮组织(癌旁对照)和12例肺良性组织分别作为对照研究组。运用免疫组化(immunohistochemistry IHC)En Vision二步法检测所有标本的HPV L1蛋白;2.以NSCLC标本IHC检测HPVL1蛋白阳性为主选择109例(98例原发灶和11例转移淋巴结)采用实时荧光定量聚合酶连反应(quantitative Real-time polymerase chain reaction q PCR)法检测HPV16/18 L1基因序列;3.随机选择90例肺腺癌标本同时行EGFR/ALK/KRAS/BRAF基因状态检测,其中ALK基因突变状态采用IHC法筛查,所有ALK IHC阳性与可疑阳性标本均采用反转录PCR(reverse transcription–PCR RT-PCR)法进行基因状态验证,EGFR/KRAS/BRAF采用q PCR法检测基因状态。结果1.NSCLC原发灶HPV L1蛋白阳性率26.5%(70/264例)显著高于癌旁组织2.3%(6/264例)(P<0.001)和肺良性组织0%(0/12例)(P=0.041)。2.NSCLC原发灶HPV L1蛋白检测阳性率26.5%(70/264例)与转移灶检出率35.4%(23/65例)相近。肺腺癌HPVL1蛋白检测阳性率33.1%(48/145例)显著高于肺鳞癌16.0%(16/100例)(P=0.003)。3.109例NSCLC标本检出HPV16/18 L1基因序列11例阳性。4.HPV L1蛋白阳性肺腺癌患者KRAS基因突变率66.7%(12/18例)显著高于HPV阴性患者33.3%(6/18例)(P=0.001),EGFR/ALK/BRAF基因状态与HPV L1蛋白阳性均无明显相关。结论1.HPV感染与NSCLC发生可能有密切关系,肺腺癌相较肺鳞癌与HPV感染关系更为密切。2.HPV16/18是NSCLC中HPV感染的两种亚型。3.HPV L1蛋白阳性肺腺癌患者高KRAS基因突变率提示KRAS突变在HPV相关肺腺癌致癌机制中可能起一定作用。