SLE患者抗Ro52抗体与NETs生成异常的相关性研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zhjkkcd
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[目的]研究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者中抗Ro52抗体与低密度粒细胞(low density granuloctyes,LDGs)和循环游离DNA(circulating cell-free DNA,cfDNA)是否具有相关性,以及抗Ro52抗体与中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)在不同诱发条件下的生成情况的关系,探讨抗Ro52抗体是否参与SLE的发病机制。[方法]纳入昆明医科大学第二附属医院风湿免疫科SLE患者32例(其中抗Ro52抗体阳性18例,阴性14例),9例健康志愿者作为对照组,各例病史资料均通过昆明医科大学第二附属医院电子病历系统收集。采用SLE疾病活动度评分(systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI)评价疾病活动度。用EDTA抗凝管抽取各入组人员全血5ml,提取外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcells,PBMCs)用于检测LDGs百分比,分离血浆冻存用于诱发NETs的实验,另选取12例(其中抗Ro52抗体阳性7例,阴性5例)和5例健康志愿者抽取5ml全血提取中性粒细胞用于佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(Phorbol 12-Myristate 13-Acetate,PMA)诱发中性粒细胞形成NETs 的实验,倒置荧光显微镜下观察NETs生成情况。使用SPSS 21.0软件包对资料进行统计分析,P<0.05表明差异具有统计学意义。使用Graphpad Prism 5统计软件进行组间比较和制图。[结果]1.SLE患者PBMCs中LDGs百分比显著高于健康对照(11.43%±10.85%vs 3.01%±1.16%,P=0.002),而抗Ro52抗体阳性的SLE患者与抗Ro52抗体阴性的 SLE 患者相比没有明显差异(11.00%±9.50%vs 11.98%±12.73%,P=0.79):2.与 LDGs<6.5%组相比,LDGs>6.5%组的降钙素原(procalcitonin,PCT)(P=0.028)和 C 反应蛋白(C-reactin protein,CRP)(P=0.047)升高具有统计学意义;3.LDGs百分比与中性粒细胞、PCT、白介素(interleukin,IL)-6、超敏CRP(High-sensitivity CRP,hs-CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、CRP呈明显正相关;4.血浆体外诱发NETs生成实验中,SLE患者组和对照组血浆均能在体外诱发健康人中性粒细胞生成NETs,SLE患者的荧光强度明显高于对照组(4001.51±1115.71 vs 2416.50±279.04,P<0.01),而抗 Ro52 抗体阳性和阴性之间在统计学上无明显差异(3818.34±1020.12vs4237.02±1225.31,P=0.382);5.SLE 患者的 cfDNA 水平明显高于对照组(236.45±112.05 vs 126.88±26.47,P=0.001),而抗Ro52抗体阳性和阴性之间无统计学意义(232.77±70.37 vs 239.69±141.31,P=0.323);6.PMA诱发中性粒细胞生成NETs实验中,SLE患者组和对照组的中性粒细胞均能在体外被PMA诱发生成NETs,SLE患者的荧光强度明显高于对照组(3043.58±140.69vs 2630.43±24.84,P<0.001),而抗 Ro52 抗体阳性和阴性之间无统计学意义(3055.64±99.10 vs 3034.97±171.86,P=0:382);7.cfDNA水平与LDGs百分比、白细胞(white blood cell,WBC)、中性粒细胞、PCT呈显著正相关。[结论]1.SLE患者NETs水平较健康对照明显升高,而抗Ro52抗体阳性与阴性SLE患者之间NETs水平没有明显差异;2.SLE患者的LDGs、WBC、中性粒细胞和PCT水平与NETs水平具有明显正相关;3.SLE患者血浆体外诱发NETs或PMA诱导中性粒细胞产生NETs能力较健康对照明显增强,而抗Ro52抗体阳性和阴性SLE患者之间上述指标没有差异。
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