辣椒抗病基因工程最大的障碍是辣椒离体培养再生,尤其是不定芽伸长形成再生幼苗困难,遗传转化效率低.本研究以16个甜(辣)椒品种为实验材料,在基因型、培养基中激素配比及其他成分的添加、外植体类型苗龄、培养条件等方面对辣椒离体再生进行了探讨,分别建立起以子叶为外植体和以茎尖为外植体的两个高效的离体培养植株再生体系.在此基础上,又对辣椒的遗传转化条件,及方法等做了研究,建立起一个高效辣椒遗传转化体系.并利用该技术体系将黄瓜花叶病毒运动蛋白(CMV MP)的缺失基因导入甜(辣)椒,通过特异PCR检测初步证实外源基因已经整合到辣椒基因组中.本研究结果表明:1.不同外植体再生能力差异很大.总体来说:茎尖>子叶>下胚轴.2.不同苗龄外植体再生能力不同.3.不同基因型再生能力差异明显.所用16个品种中甜杂七号,京研三号和赣椒一号再生能力较强.4.不同激素配合使用对辣椒再生有不同的影响.5.不定芽诱导培养基中加入4mg/L的AgNO<,3>有利于不定芽的形态建成,提高不定芽的分化效率,并减轻外植体的褐化.6.筛选到合适辣椒离体再生过程不同阶段的3种高效培养基.7.首次使用不定芽伸长两步诱导法诱导不定芽的茎伸长,使平均的不定芽伸长率从20﹪提高到60﹪.8.建立了两个高效的辣椒离体培养再生体系.9.农杆菌转化前受体的预培养2-3 d、转化后的共培养2-3 d及共培养后的延迟选择2-3 d均有利于辣椒遗传转化效率的提高.10.不同的外植体类型适宜的农杆菌感染时间也不相同.子叶外植体感染5 min为宜,而茎尖需要30 min感染时间.11.首次将CMV MP编码区缺失基因导入辣椒,用特异PCR从12个转化植株中检测出11个阳性转基因植株,PCR检出率达91.7﹪.