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水稻病毒是水稻生产上一类重要的病原物,在我国水稻种植地区广泛流行,给水稻生产造成了巨大的经济损失。为了解析病毒与寄主和介体的互作机理,本论文利用水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus, RBSDV)的沉默抑制子蛋白P6和南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus, SRBSDV)的外壳蛋白(coat protein, CP)为诱饵分别筛选水稻和白背飞虱的cDNA文库,获得与RBSDV P6互作的水稻寄主因子和与SRBSDV CP互作的白背飞虱介体因子。1与RBSDV P6互作的水稻寄主因子筛选构建了pGBKT7-P6 (RBSDV)酵母双杂交诱饵质粒,并确定P6在酵母细胞中没有毒性和自激活活性。然后将诱饵质粒与水稻叶片cDNA文库质粒共转化酵母菌株AH109,经过三缺(SD/-His/-Leu/-Trp)和四缺(SD/-His/-Leu/-Trp/-Ade)培养基的筛选,最终获得8个在酵母中与RBSDV P6互作的寄主因子片段。这8个寄主因子分别为：一个具有PHD保守结构域的蛋白、乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase)、COP9信号转导复合体5b亚基蛋白(COP9 signalosome complex subunit 5b)、一个未知功能蛋白(以下简称P6-100)、含有类似于葡萄球菌核酸酶(Staphylococcal nuclease homologues, SNase)保守结构域的蛋白、ATP合成酶δ链(putative ATP synthase delta chain)、泛素结合催化酶E2 (Ubiquitin-conjugating enzyme E2, catalytic)和己四醇醛酸脱羧酶(UDP-glucuronic acid decarboxylase)。克隆了水稻P6-100蛋白的编码基因全长,并利用酵母双杂交系统和双分子荧光互补、实验验证P6-100蛋白与RBSDVP6的互作。这些初步工作为进一步深入了解该病毒与水稻寄主间的作用机理打下基础。2与SRBSDV CP互作的白背飞虱介体因子的筛选构建了pGBKT7-CP (SRBSDV)酵母双杂交诱饵质粒,并确定SRBSDV CP在酵母细胞中没有毒性和自激活活性。然后将诱饵质粒与白背飞虱cDNA文库质粒共转化酵母菌株AH109,经过三缺(SD/-His/-Leu/-Trp)和四缺(SD/-His/-Leu/-Trp/-Ade)培养基的筛选,共获得6个在酵母中与SRBSDV CP互作的蛋白片段。这6个蛋白片段分别是：肌动蛋白(actin)、磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase, GAPDH3)、HIPV (Himetobi P virus)的外壳蛋白、线粒体蛋白、GMP合成酶(GMP synthase)以及TCP 1伽玛亚基(TCP 1 subunit gamma)。这些与病毒互作的介体因子片段的获得为深入了解该病毒与昆虫介体间的作用机理以及南方水稻黑条矮缩病的防控具有重要意义。