不同酚类物质对酒酒球菌生长影响的研究

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本实验以质膜蛋白以及H+-ATPase活性为指标,研究不同酚类物质(阿魏酸、咖啡酸和槲皮素)对酒酒球菌(O. oeni SD-2a、O. oeni HB-2b和O. oeni SD-2gf)生长的影响。为将酚类物质发展为葡萄酒酿造过程中SO2替代物提供理论基础。实验结果如下:1.阿魏酸、咖啡酸和槲皮素均会对供试菌株的生长产生抑制作用,这种作用与酚类物质含量呈正相关。不同酚类物质作用下,各菌株表现出不同的生长趋势。此外,阿魏酸和咖啡酸几乎不会影响培养基pH值;加入槲皮素之后,不同菌悬液pH值变化趋势不同。接种O. oeni HB-2b时,培养基pH值逐渐降低;分别接种O. oeni SD-2a和O. oeniSD-2gf时,培养基pH值先上升后下降,最高pH值几乎高于5.0左右,各菌悬液最终pH值也高于对照。2.质膜蛋白含量测定结果表明:不添加酚类物质时,各菌株质膜蛋白含量随发酵过程的进行逐渐升高;添加酚类物质以后,可以观察到各酚类物质对菌体质膜蛋白含量促进程度不同,与酚类含量呈正相关。与阿魏酸和咖啡酸相比,添加槲皮素时各菌株质膜蛋白含量最高。3.各菌株不同生长时期质膜H+-ATPase活性测定结果表明:不添加酚类物质时,O. oeni SD-2a、O. oeni HB-2b和O. oeni SD-2gf均在对数生长中期表现出了最大酶活。随发酵过程的进行,不同菌株酶活变化趋势有差异。O. oeni SD-2a酶活先降低后升高,O. oeni HB-2b和O. oeni SD-2gf酶活逐渐降低,且O. oeni HB-2b的酶活高于同时期其他两株菌。酚类物质会导致菌株质膜H+-ATPase活性降低,抑制程度不仅依赖于酚类和菌株的不同,菌株所处的生长阶段也是影响因素之一。相比阿魏酸和咖啡酸,槲皮素对三株菌酶活抑制强度最大,酶活最高的菌株仍然是O. oeni HB-2b,当该菌株处于对数后期时,酶活受到的抑制程度最小。4.对O. oeni SD-2a而言,咖啡酸的抑制强度最大,其次是槲皮素,抑制作用最弱的是阿魏酸;O. oeni HB-2b对咖啡酸的抗性最强,对槲皮素抗性最弱;O. oeni SD-2gf对阿魏酸敏感度最低,对槲皮素最敏感。结合各菌株生长情况和质膜蛋白含量以及H+-ATPase活性,当介质中添加50mg/L或100mg/L阿魏酸、咖啡酸或者槲皮素时,O. oeniHB-2b生存能力最强。
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