荔枝草和三种多酚类单体物质对斑马鱼肝损伤的修复作用机理研究

来源 :江西师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gao_zhenguo
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斑马鱼具有许多独特的特征,如体积小,外部受精,快速发育和对药物施用的极端敏感性等,这是筛选和评估药物的理想模型。在疾病研究中肝损伤和炎症反应是发生率较高的疾病,研究关于治疗肝损伤及抗炎的药物有很大的研究前景。本文利用硫代乙酰胺(TAA)诱导斑马鱼肝损伤模型和脂多糖(LPS)诱导的斑马鱼炎症模型评价了荔枝草乙醇提取物(SPEE)、黄芩素(BA)、槲皮素(Que)和绿原酸(CGA)的抗氧化、抗炎及保肝作用。采用了酶活测定、气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)定量分析、免疫荧光染色、蛋白质印迹(Western blot)、琼脂糖凝胶电泳、PCR及Q-PCR等方法。主要研究结果如下:1.荔枝草对LPS刺激的斑马鱼胚胎具有抗氧化作用和抗炎作用。其次,SPEE可显著减轻成年斑马鱼TAA诱导的肝空泡,脂质积聚和肝纤维化。同时,SPEE暴露后NO含量和脂质代谢相关基因ApoE和PPAR-γ含量显著下调。从机制上讲,SPEE可以减少肝细胞凋亡,促进TAA诱导模型中转录因子(Nrf2)从细胞核向细胞质的转运。最后,SPEE可以在H2O2刺激的条件下调节各种炎性细胞因子和先天免疫相关基因。2.黄芩素改善了TAA诱导的斑马鱼肝脏发育毒性。通过酶活测定发现黄芩素降低氧化应激水平,炎症因子检测发现黄芩素具有抗炎作用。Western Blot结果显示凋亡蛋白表达增加,抗凋亡蛋白表达减少现象。用PCNA染色发现增殖细胞减少等情况。从机制上讲,黄芩素通过提高p38和ERK1/2来促进PPARα活化,进而调节肝脏发育。3.通过体长,肝脏,胰腺等大小检测,发现槲皮素能够有效促进斑马鱼发育。同时通过酶活测定和炎症基因检测,本研究发现槲皮素具有抗氧化和抗炎作用。在研究槲皮素对斑马鱼发育迟缓的抗发育迟缓机制时,证明了槲皮素从调节Wnt信号通路方面来促进斑马鱼肝脏发育。4.绿原酸能够有效促进斑马鱼肝脏发育和具有抗氧化抗炎作用。在研究绿原酸治疗肝脏发育不良的分子机制时,发现绿原酸能够通过调节Wnt信号通路来治疗TAA导致的斑马鱼肝脏发育不良。结果表明荔枝草、黄芩素、槲皮素和绿原酸具有抗氧化、抗炎活性和保肝作用。为进一步开发新药和保健食品提供研究基础。
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