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心肌缺血再灌注(I/R)损伤可产生心肌细胞凋亡和坏死,导致心肌梗死面积扩大、心室重塑和心力衰竭。本研究从心肌I/R损伤致细胞凋亡的钙超载机制入手,探讨了钙调神经磷酸酶(CaN)抑制剂FK506在心肌I/R损伤过程中的作用,揭示了CaN在心肌I/R损伤致心肌细胞凋亡的调控机制。以大鼠H9c2心肌细胞为研究对象,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测过氧化氢对心肌细胞的损伤作用,单细胞凝胶电泳法检测DNA损伤,吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)双荧光染色和流式细胞术检测细胞凋亡;并建立大鼠H9c2心肌细胞凋亡的损伤模型,给予不同剂量FK506,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,观察FK506对心肌细胞凋亡的影响。建立大鼠心肌I/R损伤模型为研究对象,给予FK506进行干预,观察I/R损伤及药物干预后心肌梗死面积,心律失常程度以及血压的变化,采用生物化学法检测心肌细胞脂质过氧化水平、组织酶CK和LDH活性变化,采用免疫组织化学法检测心肌细胞凋亡相关蛋白的表达,采用Western Blot方法检测CaN蛋白的表达情况。结果表明:H2O2可引起心肌细胞的DNA损伤,诱导细胞凋亡。FK506对H2O2诱导的大鼠H9c2心肌细胞凋亡具有抑制作用。FK506干预可缩小心肌梗死面积,减轻心肌I/R损伤。FK506可增加Bcl-2蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡。因此,FK506通过线粒体途径诱导心肌I/R损伤所致的心肌细胞凋亡,CaN在I/R损伤中具有重要作用。抑制CaN活性对于抑制心肌I/R损伤,减少心肌细胞凋亡,改善心脏功能具有特别重要的意义。