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目的 结肠癌是消化系统最常见的恶性肿瘤,氟尿嘧啶、卡培他滨、奥沙利铂等化疗药物对治疗结肠癌延长生存时间取得了良好的效果,但对肿瘤的长期治疗作用有限,且毒副作用较大。因此,寻找一种治疗结肠癌效果好且经济的药物,显得十分迫切。因此本研究探讨鸦胆子素D对结肠癌细胞株HT29增殖的抑制及机制研究,为其应用于临床提供理论依据。方法人结肠癌细胞株HT29经不同浓度(0、5、10.20、30、80μmol/L)鸦胆子素分别作用24、48、72h后,应用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测鸦胆子素D对HT29细胞的增殖抑制作用：流式细胞术检测鸦胆子素D对HT29凋亡的影响；Western blot检测HT29细胞株经不同浓度鸦胆子素D处理24 h后细胞中JNK、p-JNK的表达,并对20 μmol/L的鸦胆子素D处理24 h、48 h、72h后,细胞中JNKvp-JNK的表达进行分析。建立结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为四组,每组10只,予以鸦胆子素D (0. 0.375mg/Kg·d、0.75 mg/Kg·d、1.5 mg/Kg·d)处理2周后,继续观察裸鼠移植瘤的生长情况2周,处死裸鼠后,检测皮下移植瘤重的差异,Western blot及免疫组织化学法检测结肠肿瘤组织中JNK、p-JNK的表达。结果1.(0、5、10、20、30、80μmol/L)鸦胆子素D分别作用结肠癌HT29细胞24 h后,细胞存活率是100%、93.83%、82.50%、71.16%、63.39%、38.56%：作用48 h后细胞的存活率是100%、82.87%、68.62%、52.25%、39.33%、28.55%；作用72 h后细胞的存活率是100%、72.60%、55.37%、40.68%、34.68%、20.01%。2. (0、5、10、20、30、80μmol/L)鸦胆子素D分别作用结肠癌HT29细胞株24 h后,细胞的凋亡率是0、10.32%、19.36%、30.61%、43.47%、66.56%；作用48 h后细胞的凋亡率是0、19.23%、31.26%、47.63%、58.91%、70.08%；作用72 h后细胞的凋亡率是0、27.64%、45.22%、58.28%、64.56%、79.37%。3.20 μmol/L鸦胆子素D对HT29细胞株作用0、24、48、72 h后,JNK、p-JNK蛋白表达随鸦胆子素D作用时间延长而上调,(0、5、10、20、30、80μmol/L)鸦胆子素D对HT29细胞株作用24 h后,JNK、p-JNK蛋白表达随鸦胆子素D浓度增加而上调。4.不同浓度(0、0.375mg/Kg·d、0.75 mg/Kg·d、1.5 mg/Kg·d)鸦胆子素D处理结肠癌裸鼠移植瘤模型后,相同作用时间,浓度越高肿瘤生长越缓慢。5.处死裸鼠后取瘤体称重,(0、0.375mg/Kg·d、0.75 mg/Kg·d、1.5 mg/Kg·d)随着鸦胆子素D处理浓度的增加,剂量越大肿瘤的重量越小。6.处死裸鼠后,Western blot检测肿瘤组织中JNK、p-JNK的表达,随着鸦胆子素D处理浓度增加,JNK的表达升高。结论 1.不同浓度的鸦胆子素D随着浓度的增加及时间的延长,结肠癌HT29细胞的存活率降低,呈明显的作用-时间-药物浓度依赖性；随着鸦胆子素D的浓度增加或同一浓度的鸦胆子素D随着作用时间的延长,结肠癌HT29细胞凋亡率增高,呈明显的作用-时间-药物浓度依赖性。2.随着鸦胆子素D的浓度增加或同一浓度的鸦胆子素D随着作用时间的延长,结肠癌细胞株HT29中JNK、p-JNK蛋白表达随鸦胆子素D浓度增加而上调。3.随着浓度增加,鸦胆子素D对裸鼠移植瘤的生长抑制越明显。4.肿瘤组织中JNK、p-JNK蛋白的表达随着鸦胆子素D浓度增加,JNK的表达增加。5.鸦胆子素D可能通过激活JNK信号通路抑制结肠癌细胞的增殖并诱导其凋亡。