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目的1.建立曲马多死后分布、死后弥散研究动物模型和保存检材中曲马多分解动力学研究(动物)模型；2.研究曲马多在家兔体内的死后分布、死后弥散及保存检材中的分解动力学规律,为曲马多中毒(死)案件的法医学鉴定提供实验依据。方法1.死后分布家兔6只,经灌胃匀速注入10LD50曲马多。观察生命体征变化,待呼吸和心跳全部消失时,迅速解剖,取心血、胆汁、玻璃体液、尿、右上肢肌肉、右下肢肌肉、胸肌、心、肝、脾、肺、肾、脑、胃。GC/MS法定性、GC法定量检测其中曲马多。2.死后弥散取健康雄性家兔24只,随机分为死后弥散组(15只)和剂量影响组(9只)。死后弥散组：将家兔空气栓塞处死2h,1／4 LD50曲马多灌胃染毒,分别于0.25h、0.5h、1h、3h、6h各随机解剖3只动物,取心血、周围血、胆汁、尿、玻璃体液、右上肢肌肉、右下肢肌肉、胸肌、心、肝、脾、肺、肾、脑、胃,置于-20℃冰箱内保存待检,GC/MS和GC法检测其中曲马多。剂量影响组：将家兔仰卧位固定于兔台上,插胃管后,空气栓塞处死；死后2h,分别以1／8 LD50(3只)、1／4 LD50(3只)和1／2 LD50(3只)曲马多灌胃染毒,0.25h后解剖动物,取心血、周围血、胆汁、尿、玻璃体液、右上肢肌肉、右下肢肌肉、胸肌、心、肝、脾、肺、肾、脑、胃,置于-20℃冰箱内保存待检,GC／MS和GC法检测其中曲马多。3.保存检材中分解动力学研究雄性犬6只,4LD50剂量曲马多(0.228g／kg)灌胃后2h,经股动脉插管采血,肝素抗凝；夹闭气管处死,取肝脏。每只犬血和肝均分为四等份,分别置于20℃、4℃、-20℃、20℃(血加NaF至1%,肝4%甲醛固定)保存,于第Oh、7d、27d、53d,99d、156d、220d,GC/MS和GC法定性、定量检测其中曲马多。WinNorLin药代动力学软件处理平均药物浓度,AIC信息判据判定动力学模型,拟合分解动力学方程,计算分解动力学参数。结果1.死后分布染毒后0.5±0.25h家兔出现中毒症状,2±0.5h后死亡。体内曲马多含量由高到低分别为肾(162.96±15.27μg／g)>胃(135.27±14.48μg／g)、肝(130.22±53.65μg／g)、脾(112.48±14.16μg／g)>肺(83.04±19.36μg／g)、脑(73.92±32.20μg／g)、心(71.86±12.16μg／g)、上肢肌肉(57.63±19.92μg／g)、下肢肌肉(54.77±17.40μg／g)>尿(1.44±0.07μg／mL)、胆汁(0.72±0.13μg／mL)、心血(.72±0.19μg／mL)、玻璃体液(0.38±0.05μg／mL)。2.死后弥散1／4LD50死后灌胃染毒0.25-6 h,家兔各组织脏器均可检出曲马多。染毒剂量增加可促进死后弥散发生,死后灌胃染毒0.25h,除1／8LD50染毒家兔玻璃体液、胆汁、尿、脑、肺、右上肢肌肉、右下肢肌肉均未检出曲马多外,其余所取脏器和体液中均检出曲马多；随着死后染毒剂量的增加各检材中检出曲马多含量增高。与10LDso染毒致死家兔相比,1／4LD50死后染毒0.25-6h内,家兔各组织中曲马多最高浓度均较染毒致死家兔低(P<0.05),体液中曲马多最高浓度均较染毒致死家兔高(P<0.05)；1／2LD50死后染毒0.25h,家兔各组织中曲马多浓度均较染毒致死家兔低(P<0.05),体液中曲马多浓度均较染毒致死家兔高(P<0.05)；1／8 LD50和1／4 LDso死后染毒0.25h时,家兔各组织和体液中曲马多浓度均较染毒致死家兔低(P<0.05)。3.保存检材中分解动力学不同条件保存血和肝中曲马多含量均呈下降趋势,20℃、4℃、-20℃、20℃(1%NaF)保存156d血中曲马多含量显著下降(p<0.05)；20℃、4℃、-20℃、20℃(4%甲醛)保存至27d、53d、156d、27d曲马多含量显著下降(p<0.05)；保存至220d时,血和肝脏中曲马多浓度分别显者下降至最初浓度的41.9%(20℃)、41.3%(4℃)、50.0%(-20℃)、63.7%(20℃,1%NaF)和42.97%(20℃)、49.50%(4℃)、49.49%(-20℃)、55.63%(20℃,4%甲醛)。其分解动力学符合一级动力学过程—室开放模型,可用CT=Coe-KeT表示。保存血液中曲马多的分解半衰期(t1／2)分别是200.5 d(20℃)、163.3d(4℃)、190.9d(-20℃)和307.3 d(20℃,1%NaF)。保存肝脏中曲马多的分解半衰期(t1／2)分别为137.8d(20℃)、175.2d(4℃)、268.8d(-20℃)和241.3d(20℃,4%甲醛)；根据CT=Coe-KeT方程计算的各样本中曲马多含量理论值与实测值接近。结论1.采用10LD50剂量(兔)、1/8LD50、1/4LD50、1/2LD50剂量(兔)和4LD50剂量(犬)曲马多灌胃染毒,建立了曲马多的死后分布、死后弥散、保存检材中分解动力学动物模型,可应用于曲马多中毒(死)的法医学检验和法医毒物动力学研究。2.10LD50剂量曲马多染毒致死家兔体内曲马多含量由高到低分别为肾>胃、肝、脾>肺、脑、心、上肢肌肉、下肢肌肉>尿、胆汁、心血、玻璃体液。提示除血、胃(胃内容)外,肾、肝也是曲马多中毒(死)案件法医学鉴定中毒物分析的较好检材,死后分布规律也可应用于极端案件(如碎尸)血中曲马多含量的推断。3.曲马多在家兔体内可发生死后弥散,且与染毒剂量的关。1／4LD50和1／2LD50死后染毒后3-6h和0.25h,家兔体内曲马多含量显著高于4LD50剂量染毒致死家兔。曲马多中毒(死)案件法医学鉴定时,应考虑死后弥散和死后再分布对毒物分析结果的影响,还应排除死后染毒的可能性,死后弥散规律还可用于生前服药和死后染毒的鉴别。4.曲马多在保存犬血液和肝脏中可发生分解,含量呈下降趋势,低温保存和添加防腐剂(甲醛固定)可减缓曲马多的分解,使曲马多含量下降减缓,分解半衰期延长。曲马多中毒(死)案件的法医学鉴定中,检材应在一个月内及时送检和检测,若不能及时送检,应冷冻保存或添加抑菌剂,并尽快检验。5.曲马多在不同条件保存血和肝脏中分解符合一级动力学过程一室开放模型,在曲马多中毒(死)案件法医学鉴定时,可采用CT=Coe-KeT公式和分解动力学参数推断取材当时体内曲马多浓度或送检当时检材中曲马多含量,为曲马多中毒(死)案件法医学鉴定提供科学依据。