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本研究利用植物生长延缓剂烯效唑对田间栽培远志的生长进行人工化学调控,通过对不同施用浓度、施用时间及施用方式的考察,以相关形态、生理指标并结合主要药用活性成分的含量检测为依据,筛选适宜实现远志田间化控的操作方法,并进一步对烯效唑的残留及浸种处理效果等进行了实验研究。主要结果如下:1远志中主要药用成分含量测定的方法学研究1.1远志中远志酸的HPLC含量测定方法参考药典方法,对远志酸HPLC含量测定方法进行优化。方法学研究表明,远志酸含量在25.7256.8μg·mL-1范围内线性关系良好,回归方程为y=19.525x-23.632,r=0.9995。远志酸检测限为2.24×10-3mg·mL-1,定量限为7.47×10-3mg·mL-1,精密度、重复性和稳定性实验RSD值分别为0.48%、2.29%和0.99%,远志酸的平均回收率为99.9%,RSD值为0.43%。以远志酸计算理论塔板数约为4700,分离度为1.3。该方法色谱峰无拖尾现象,出峰时间适中,准确可靠,可用于远志样品中远志酸含量的测定。1.2远志中可溶性还原糖和粗多糖的含量测定方法以葡萄糖为标准品,采用分光光度法对远志药材中可溶性还原糖和粗多糖含量进行测定。实验结果表明,葡萄糖浓度在10.1101.0μg·mL-1范围内时线性关系良好,回归方程为y=0.0087x-0.0223,r=0.997。方法精密度、重复性和稳定性实验RSD值分别为0.03%、2.07%和0.19%,可溶性还原糖和粗多糖的平均回收率分别为100.1%和99.5%,RSD值分别为0.75%和1.56%。该方法具有快速、准确、重复性好等特点,可用于远志中可溶性还原糖和粗多糖含量的测定。1.3远志中总皂苷的含量测定方法以齐墩果酸为标准品,本实验确定了远志药材中总皂苷的提取及含量测定方法。实验表明,齐墩果酸含量在7.474.0μg·mL-1范围内线性关系良好,回归方程为y=0.0156x-0.0306,r=0.9976。方法精密度、重复性和稳定性实验RSD值分别为0.26%、1.60%和2.35%,齐墩果酸平均回收率为100.2%,RSD值为1.45%。本方法精密度高、重复性好,可用于远志中总皂苷的含量测定。2烯效唑对栽培远志生长、主要药用成分含量及残留的研究2.1烯效唑对栽培远志生长的影响本实验测定了烯效唑给药处理的远志样品中叶绿素含量,并以根直径和根干重为指标,研究了烯效唑对远志生长的综合影响。研究表明,烯效唑能明显提高远志中叶绿素的含量,且叶绿素在喷施处理远志中的含量要高于根灌处理。在7月采用根灌方式以0.3g·m-2或0.4g·m-2给药量施用烯效唑对远志生长的影响最好,其综合指标数值均为2.43。在7月采用喷施方式以0.4g·m-2给药量施用烯效唑或采用根灌方式以0.2g·m-2给药量施用烯效唑也有较好的效果,其综合指标数值分别为2.41和2.35。2.2烯效唑对栽培远志中可溶性还原糖和粗多糖含量的影响烯效唑能明显提高远志中可溶性还原糖和粗多糖含量,但不同方法对两种糖类成分提高的综合效果略有不同。在9月采用根灌方式以0.4g·m-2给药量施用烯效唑对远志中糖含量的提高效果最明显,其综合指标数值最高,为15.67;其次是在10月采用喷施方式以0.1g·m-2或0.2g·m-2给药量施用烯效唑,其综合指标数值分别为15.53和15.17。2.3烯效唑对栽培远志中皂苷含量的影响以远志酸和总皂苷为含量测定指标,研究烯效唑对远志中皂苷类成分含量的影响。研究表明,在7月采用喷施方式以0.2g·m-2给药量或在10月采用根灌方式以0.2g·m-2给药量进行烯效唑给药处理,对远志中皂苷类成分含量提高的综合效果最好,其综合指标分别为2.53和2.52。此外,在7月采用根灌方式以0.2g·m-2给药量施用烯效唑对远志中皂苷类成分含量的提高也有较好效果,其综合指标为2.35。2.4烯效唑对栽培远志主要药用成分含量的综合影响以远志酸、总皂苷、可溶性还原糖和粗多糖含量为指标研究烯效唑对远志主要药用成分的综合影响,结果表明,在9月采用根灌方式以0.4g·m-2或采用喷施方式以0.3g·m-2给药量施用烯效唑对远志中主要药用成分含量的综合影响最好,其综合指标数值为7.12和7.10。此外,在7月采用根灌方式以0.3g·m-2给药量进行烯效唑给药处理也有较好效果,其综合指标分别为7.07。2.5烯效唑田间重复实验对栽培远志生长及主要药用成分含量的影响7月份时,采用喷施和根灌方式以0.2g·m-2给药量对栽培远志施用烯效唑,研究烯效唑对栽培远志生长及主要药用成分含量的综合影响。实验结果表明,根灌处理的远志综合指标为5.98,高于喷施处理远志的综合指标5.77。两种给药方法中,根灌处理的效果要优于喷施处理。2.6烯效唑在栽培远志中的残留量的分析本实验建立远志药材中烯效唑残留的HPLC检测方法,并对烯效唑给药量最大的5个样品进行了检测。在本实验条件下,以上样品在烯效唑保留时间均未出峰,表明未检测到烯效唑残留。实验结果表明,当烯效唑给药量在0.4g·m-2范围内时,是安全的。3烯效唑浸种处理对远志种子萌发及幼苗生长影响的研究烯效唑浸种处理具有抑制远志种子萌发、提高远志幼苗中叶绿素含量以及增加幼苗鲜重的作用。研究表明,使用10mg·L-1烯效唑溶液对远志种子浸种处理6h,在不影响远志种子萌发的同时,对幼苗叶绿素含量和鲜重指标的提高作用最明显。