【摘 要】
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第一部分:血管生成素-1和血管内皮生长因子重组质粒的制备与鉴定.目的:制备并鉴定实验用高纯度的血管生成素-1(Angiopoietin-1 Ang1)和血管内皮生长因子(Vascular Endothelia
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第一部分:血管生成素-1和血管内皮生长因子重组质粒的制备与鉴定.目的:制备并鉴定实验用高纯度的血管生成素-1(Angiopoietin-1 Ang1)和血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor VEGF<,165>)重组质粒.成功地获得足量高度纯化的血管生成素-1和血管内皮生长因子重组质粒.第二部分:血管生成素-1和血管内皮生长因子体外诱导内皮细胞芽生和迁移的作用.目的:观察联合应用Ang1和VEGF<,165>两种生长因子对内皮细胞迁移、芽生的影响,为下一步动物实验提供理论基础.联合Ang1和VEGF<,165>可增强内皮细胞的迁移和芽生.第三部分:免急性下肢缺血模型的建立及经骨骼肌重组质粒的转染与表达.目的:建立兔急性下肢缺血模型,探讨经肌肉直接注射质粒DNA方法的可行性,检测骨骼肌的转染率及表达.建立兔急性下肢缺血模型方法简便,成功率高,骨骼肌细胞可吸收并表达裸质粒DNA,经肌肉直接注射转染质粒DNA是有效的.第四部分:血管生成素-1和血管内皮生长因子VEGF<,165>对兔下肢缺血血管形成的影响.目的验证血管生成素-1和血管内皮生长因子VEGF<,165>在兔急性下肢缺血模型血管形成中的作用,评价缺血下肢血运重建情况.Ang1可促进兔急性缺血肢体对VEGF<,165>血管生成的反应,经肌肉联合多种细胞因子促进兔缺血肢体血运重建是可行的.DSA是评价基因治疗后新生血管形成的金标准,CE-MRA评价肢体血运重建具有广阔的前景.第五部分:促血管生长因子治疗严重下肢缺血的临床前期试验.多数持续性疼痛和缺血性溃疡的病人不适合进行外科手术和经血管内途径治疗,尚无特效药物能够有效治疗下肢血管病变,因此对外周血管阻塞性疾病的治疗方法有待于积极的探索.重组血管生长因子蛋白和基因是一种新的治疗下肢缺血的方法,仍需改进基因转染方法和更好的理解血管形成方式.血管造影揭示转染Ang1+VEGF<,165>后新生血管比单独转染VEGF<,165>多,说明联合应用Ang1和VEGF治疗下肢缺血可以产生更多、更好的血管,另外给予外源性血管生长因子结合中等强度锻炼,更能增加侧枝血流和改善肌肉功能.因此对外周阻塞性血管病变不能用传统的血运重建方法治疗的病人,血管生长因子治疗提供了一种新的可选择的方法,联合基因治疗和合理锻炼将得到更加完全的缺血下肢血运恢复.
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