中药复方益糖康对DN大鼠肾脏nephrin、VEGF表达的影响

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目的:观察糖尿病肾病(diabetien ephropathy,DN)大鼠肾脏nephrin、VEGF的表达,研究中药复方益糖康对DN大鼠肾脏nephrin mRNA基因和蛋白、VEGF mRNA基因和蛋白表达的影响。材料与方法:清洁级SD雄性大鼠60只,体重220±20g,12周龄,适应性喂养1周后按体重随机选出10只为正常对照组,其余50只单次腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型。2周后成DN模型,按血糖值随机分为5组,每组10只:模型对照组,预防组,中药低剂量组,中药高剂量组,西药组。各组按相应药物及剂量灌胃。灌胃6周末,检测24h尿蛋白,肌酐,尿素氮,RT-PCR和Western blot法分别检测nephrin、VEGF基因和蛋白的表达。结果:1.模型组血清中24h尿蛋白、肌酐、尿素氮均较正常对照组升高(p﹤0.01),与模型组比较,预防组、中药低剂量组、中药高剂量组24h尿蛋白、肌酐、尿素氮水平明显下降(p﹤0.01,p﹤0.05)。2.模型组大鼠肾脏组织中nephrin表达较正常对照组明显降低(p﹤0.01),与模型组比较,预防组、中药低剂量组、中药高剂量组大鼠肾脏组织中nephrin表达明显增加(p﹤0.01),与预防组比较,中药低剂量组、中药高剂量组大鼠肾组织nephrin蛋白表达明显减少(p﹤0.01),与中药低剂量组比较,预防组、中药高剂量组大鼠nephrin蛋白表达明显增加(p<0.01)。3.模型组大鼠肾脏组织中VEGF表达较正常对照组明显增加(p﹤0.01),与模型组比较,预防组、中药低剂量组、中药高剂量组大鼠肾脏组织中VEGF表达明显降低(p﹤0.01),与预防组比较,中药低剂量组、中药高剂量组大鼠肾组织VEGF表达明显增加(p﹤0.01),与中药低剂量组比较,预防组、中药高剂量组大鼠nephrin蛋白表达明显减少(p<0.01)。结论:1.中药复方益糖康减少DN模型大鼠24h尿蛋白排泄,降低血清中肌酐、尿素氮水平。2.中药复方益糖康促进DN模型大鼠肾脏nephrin的表达,提示益糖康可能通过维持足细胞及肾小球滤过屏障的完整性,发挥保护肾脏的作用。3.预防组DN模型大鼠肾脏nephrin的表达较中药低剂量组、高剂量组明显增加,提示益糖康早期干预可能对DN模型大鼠肾脏足细胞有更好的保护作用;中药高剂量组DN模型大鼠肾脏nephrin的表达明显增加,提示高浓度的益糖康可能对DN模型大鼠肾脏足细胞保护意义更大。4.中药复方益糖康可以抑制DN模型大鼠肾脏VEGF表达,提示其可能是预防及治疗DN的作用靶点之一。5.预防组DN模型大鼠肾脏VEGF的表达较中药低剂量组、高剂量组明显减少,提示益糖康早期干预可能对DN模型大鼠肾脏有更好的保护作用;中药高剂量组DN模型大鼠肾脏VEGF的表达明显增加,提示高浓度的益糖康可能对DN模型大鼠肾脏的保护意义更大。
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