重症肌无力中医证型与肠道菌群相关性研究

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tyycyf
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目的:为了探究重症肌无力患者的肠道菌群信息,并从肠道菌群角度探究重症肌无力脾胃虚损证的本质,为进一步研究提供新思路。方法:一、临床部分本研究为观察性研究。共纳入28名重症肌无力患者及6名健康志愿者,其中脾胃虚损证10名,脾虚湿热证8名,脾肾亏虚证10名,收集志愿者的临床信息。将志愿者新鲜粪便进行16S rRNA基因测序,通过生物信息学分析,对比四组间的菌群信息差异。二、实验部分本研究采用主动免疫法建立实验性自身免疫性小鼠模型,分为CFA组和造模组,造模成功后将造模组分为EAMG组和QJJL组,QJJL组给予强肌健力胶囊干预,其余两组给予等量蒸馏水。首次免疫60天后进行相关表型检测及进行粪便16S RNA基因测序,通过生物信息学分析,对比三组间的菌群信息差异。结果:一、临床部分(一)Alpha多样性分析中,在四组间,chao指数和ace指数,对比健康组,脾胃虚损组和脾虚湿热组均有升高,脾肾亏虚组略有下降;shannon指数、simpson指数,健康组和重症肌无力三组间差别并不大;Alpha多样性指数差异均无统计学意义。Beta多样性分析结果提示四组间菌群独特构成,但需进一步验证。(二)在物种组成上,对比脾胃虚损组和脾肾亏虚组,脾虚湿热组的拟杆菌门丰度较高,厚壁菌门丰度较低。在脾胃虚损组中,乳杆菌属丰度最高,链球菌属、韦荣氏菌属丰度升高幅度较大;在脾肾亏虚组中,巨单胞菌属丰度明显升高;在脾虚湿热组中,普雷沃氏菌属丰度明显升高;拟杆菌属丰度下降幅度较大。重症肌无力三组的阿克曼氏菌属丰度均有下降的趋势。(三)在LEfSe分析中,在脾胃虚损组中,韦荣氏菌属、Roseburia、链球菌属、Coriobacteriaceae、罗氏菌属、棒杆菌属相对丰度明显升高。在脾虚湿热组中,普雷沃氏菌属相对丰度明显升高。在脾肾亏虚组中,嗜血菌属、巨单胞菌属相对丰度明显升高。二、实验部分(一)Alpha多样性分析中,EAMG组的chao指数、ace指数、shannon指数下降,QJJL组三项指数均有回升,组间差异有统计学意义;而simpson指数三组间差异无统计学意义。Beta多样性分析结果提示三组间菌群明显的构成差异。(二)在物种组成上,QJJL组能逆转EAMG组升高的拟杆菌门的丰度,以及降低的厚壁菌门的丰度。相比EAMG组,QJJL组能降低普雷沃氏菌属、萨特氏菌属、Allobaculum丰度,并能提高颤螺旋菌属、粪球菌属、梭菌属、阿克曼氏菌属丰度。(三)在LEfSe分析中,在CFA组中,螺杆菌属、脱硫弧菌属、颤螺旋菌属、Butyricicoccus、粪球菌属、盐杆菌属、Mucispirillum相对丰度明显升高。在EAMG组中,萨特氏菌属、粪芽孢菌属、Allobaculum、普雷沃氏菌属相对丰度明显升高。在QJJL组中,阿克曼氏菌属、梭菌属是优势菌群。结论:本研究发现了重症肌无力患者有独特的肠道菌群构成;在不同中医证型的重症肌无力患者肠道菌群存在差异,造成差异的原因可能与物质能量代谢有关。进一步实验发现,EAMG模型符合脾胃虚损的表现,并存在肠道菌群紊乱,强肌健力胶囊能够在一定程度恢复肠道菌群,并可能通过肠道菌群改善重症肌无力的症状,其中阿克曼氏菌属可能是重要的靶点。
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