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目的: 研究DHODH对神经母细胞瘤生长和代谢的调控作用,并阐明其分子调控机制,为研究神经母细胞瘤的发生和靶向治疗提供新的思路和策略。 方法: 1)通过对R2微阵列分析平台中的神经母细胞瘤公共数据库进行检索,利用GraphPad棱镜软件对该数据库中DHODH的表达量进行Kaplan–Meier分析,绘制生存曲线和箱形图,并结合统计学分析,获得DHODH与神经母细胞瘤预后、发病年龄、临床分期、进展与复发之间的相关性。 2)采用慢病毒过表达体系,研究DHODH高表达对神经母细胞瘤生长和增殖的影响;利用shRNA基因沉默技术研究DHODH基因沉默对神经母细胞瘤生长和增殖的影响。 3)通过mRNA基因芯片分析,结合生物信息学分析平台,探索神经母细胞瘤原癌基因MYCN与嘧啶核苷酸代谢通路及其关键酶DHODH的关系,并深入阐明其相互作用方式。 结果: 1)Kaplan–Meier分析结果表明,DHODH的表达量与神经母细胞瘤的预后密切相关。DHODH表达量高,预后差,患者生存率低;DHODH在预后差的IV期神经母细胞瘤患者中表达量明显增高;DHODH在诊断年龄大于18个月的患者中的表达水平显著高于诊断年龄在18个月以内的患者;DHODH在进展和复发的患者中的表达水平显著高于未进展或未复发的患者。 2)过表达DHODH促进神经母细胞瘤生长和增殖,而基因沉默DHODH抑制神经母细胞瘤的生长,诱导细胞自噬死亡。 3)mRNA基因芯片表达谱分析结合DAVID在线生物信息分析系统发现,MYCN与嘧啶代谢通路存在显著相关性,且其代谢通路中关键基因DHODH的表达明显上调,MYCN在DHODH启动子区域的结合量明显增高。 结论: 1)DHODH与神经母细胞瘤的预后、临床分期、诊断年龄、进展和复发密切相关,可作为神经母细胞瘤预后的标记物。 2)DHODH在神经母细胞瘤的生长和增殖中有重要调控作用。 3)MYCN作为DHODH上游调控基因,参与调控神经母细胞瘤的嘧啶核苷酸合成代谢。