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棉籽饼粕是来自棉籽的植物性蛋白资源,其蛋白质含量高达33%-45%,但因其存在毒性物质——游离棉酚,严重影响了其利用价值。本课题采用黑曲霉、米曲霉及酿酒酵母复合微生物固态发酵技术,降低了棉籽饼粕中的游离棉酚含量,增加了蛋白质含量。经过酶水解得到植物小分子肽,再低温、低酸水解得到复合氨基酸液,再用水解后的渣料补原、辅料后接入几种益生菌制备益生菌生物活性饲料。本文研究了黑曲霉、米曲霉与酿酒酵母混合固态发酵对棉籽饼粕脱毒的发酵条件。结果表明,混合发酵的最佳条件为:发酵温度34℃,湿度为85%,接种量均为10%,物料干基:水=1:1,发酵时间48h。发酵后棉籽饼粕中游离棉酚去除率达到96.2%,而且发酵后的粗蛋白含量由原料的42.8%增加到44.6%研究了经复合微生物发酵后棉籽饼粕的酶解条件。利用发酵过程中微生物代谢产生的酶系对棉籽饼粕进行水解生产液体小分子肽或小分子肽粉。结果表明,酶水解最佳条件为:发酵棉籽饼粕与2.5倍的水混合放入温度为55℃的恒温水浴锅中,水解12h,水解过程中保持PH值为6.5。最终水解率为11.24%。得到的液体小分子肽中,游离棉酚含量为19.9mg/Kg,即0.00199%,分子量小于1000Da的小肽占总量的93.4%,而且分子量大于2000Da的小肽仅占1.8%。研究了利用酶水解后的滤渣,加水后进行低温、低酸水解的工艺。结果表明,最佳低温、低酸水解条件:水解温度为90℃,加酸量为7.5%,水解12小时。水解液中的氨基酸含量达到1.52g/100ml,游离棉酚含量为15.4mg/Kg,即0.00154%,氨基酸生成率达58.6%。同时水解液中未检出3-氯丙醇。利用酸水解后的滤渣,补加一部分原、辅料后,接入地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌等益生菌,混合发酵生产益生菌生物活性饲料。研究了多菌种混合发酵的发酵工艺,结果表明,最佳发酵工艺条件为:发酵温度为32℃,原料含水量为50%,芽孢杆菌(E01:E02=1:1)接入时间为发酵后12h,发酵12h后乳酸菌接种量为10%,发酵时间为48h。发酵后饲料粗蛋白含量由原来的27.58%提高到37.92%,氨基酸态氮含量为1.88%,酵母菌活菌数达2.2亿/克(干基),乳酸菌活菌数达2.3亿/克(干基),芽孢杆菌达18.4亿/克(干基)。同时饲料中游离棉酚含量为45.2mg/Kg。