IL-22对SW982细胞增殖、凋亡及关节重塑相关基因表达影响的研究

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目的:本实验研究不同浓度IL-22对SW982细胞增殖、调亡及关节重塑相关基因(OPG、MMP13、VEGF和IL-1β)mRNA表达的影响。  方法:体外用含有10%FBS的DMEM高糖培养基培养人滑膜细胞系SW982,再将细胞种入12孔板,待细胞贴壁后无血清处理24h,再次加入Nil(Control)和IL-22(0.1ng/mL、1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL和40ng/mL)进行干预,用MTT的方法检测加入IL-22后12h、24h、48h和72h细胞活力的变化;在CFSE处理细胞后用流式细胞术检测加入IL-22后0h、12h、24h、48h和72h细胞增殖的变化;加入IL-22干预48h后用Trizol法提取每组细胞RNA,并反转录为cNDA,再用real-timePCR技术检测每组关节重塑相关基因OPG、MMP13、VEGF和IL-1β mRNA水平的变化;加入IL-22干预48h后用Annexin V-FITC和PI双染细胞在运用流式细胞术检测细胞凋亡的变化;加入IL-22干预48h后用200μM(μmol/L)H2O2诱导SW982细胞凋亡24h,Annexin V-FITC和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡的变化。应用SPSS19.0统计软件进行统计学处理,差异有显著性标准为P<0.01。  结果:(1)不同浓度IL-22在0-72h之间对SW982细胞活力没有影响。(2)不同浓度IL-22在0-72h之间对SW982细胞增殖没有影响。(3)不同浓度IL-22(5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL和40ng/mL)对SW982具有抗凋亡的作用。(4)浓度为10ng/mL的IL-22可使关节重塑相关基因(OPG、MMP13、VEGF和IL-1β)mRNA表达发生显著的变化。(5)浓度为10ng/mL的IL-22对H2O2诱导SW982细胞的凋亡过程具有保护的抗凋亡作用。  结论:不同浓度IL-22在0-72h之间对SW982细胞活力及增殖没有影响;5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL和40ng/mL的IL-22对SW982具有抗凋亡的作用;10ng/mLIL-22可使关节重塑相关基因(OPG、MMP13、VEGF和IL-1β)表达发生显著的变化;10ng/mLIL-22对H2O2诱导SW982细胞的凋亡过程具有抗凋亡作用,故10ng/mL的IL-22为体外培养滑膜细胞有效的刺激浓度。
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