HCMV临床病毒株的分离及其特定基因结构分析和表达研究

来源 :暨南大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:JAVA_Star
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:1.分离广州地区围产新生儿感染的人巨细胞病毒(HumanCytomegalovirus,HCMV)临床病毒株;2.研究这些低传代HCMV临床病毒株基因组中的特有基因UL136~UL148的结构,分析其结构多态性与HCMV先天性感染致病的关系;3.研究HCMV临床毒株特有基因的表达情况,探讨这些基因编码产物的功能,揭示它们在先天性HCMV感染的致病机制中可能的作用。试图通过这些研究为临床低传代HCMV临床致病机制的研究奠定基础。 方法:1.从广州地区先天性感染HCMV的新生儿尿液中分离野生型HCMV病毒,获取病毒DNA和RNA;2.根据GenBank公布的HCMV低传代毒株Toledo的UL136-UL148等13个基因全序列及有关文献,应用PCR技术扩增这些特有基因片段;3.应用基因克隆技术构建这些特有基因的重组质粒;4.对重组体进行测序;5.应用生物信息学方法分析这些基因结构、及其编码蛋白质的多态性;6.应用RT-PCR技术检测上述基因mRNA的表达情况;7.并分析其编码产物的基本性质和特征。 结果:1.成功分离获得4株HCMV临床低传代病毒株:HCMV D3、D2、D52、C30;2.以HCMV D3临床毒株为研究主体,应用PCR技术成功扩增出UL136~UL148特有区域的全部13个基因,同时扩增其他临床毒株的相应基因,获得上述毒株的13个特有基因的总共32个全基因序列;3.克隆测序,序列呈报GenBank,收录序列号为:DQ180354~DQ180391;4.对临床毒株的这些基因及其编码的蛋白质进行同源性比较分析,发现大部分基因较为保守,具有相对稳定的序列,同时又具有较为丰富的多态性;5.从C30野生毒株中能检测到UL137、UL142、UL144、UL145和UL148等5个基因存在mRNA水平的表达。 结论:1.广州地区围产新生儿感染HCMV的临床毒株基因组中,存在着实验病毒株所缺失的UL136~UL148等13个独特基因结构,并且具有较为丰富的多态性。2.本研究初步证实了其中UL137、UL142、UL144、UL145、UL148等5
其他文献
目的:观察依托考昔应用于皮肤扩张器植入术超前镇痛的临床效果。方法:选择ASAⅠ~Ⅱ级拟行皮肤扩张器植入术患者80例,随机分为依托考昔超前镇痛组(超前镇痛组)和对照组,每组40例。
患者女,25岁,右利手。癫痫病史15年,发作表现为:双眼呆滞,呼唤无反应,继而双手摸索,持续约2~3min。无先兆,发作频率约10次/月。有时继发全面性强直-阵挛发作,频率约4~5次/年。先
ue*M#’#dkB4##8#”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:(100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
肺癌是世界上发病率、死亡率最高的恶性肿瘤,虽然在过去几十年中,肺癌在诊断、治疗、发病机制等方面都取得了较大的进步,但总生存率仍然没有明显改善,目前非小细胞肺癌总体5
文字学课程是高校汉语言文学专业开设的一门专业选修课。在传统文化视域下,完善课程教学内容、改善教学方法是文字学课程教学改革的重要内容。文字学课程改革一方面加强教材
钙离子是心脏正常工作中极为重要、不可或缺的关键离子,深刻的影响着心脏的电兴奋、肌肉收缩、信号转导和基因表达等一系列生理过程,是心脏兴奋收缩耦联过程中连接电学和力学
目的观察百蕊草片治疗呼吸系统感染疾病的临床效果。方法将2016年3月-2017年4月来医院就诊的呼吸系统感染疾病患者76例,均不使用任何西药和抗菌素类药物治疗,仅使用百蕊草品
  细胞膜是高等生命体基本结构单元“细胞”的天然屏障,它把细胞与外界环境分离开来。细胞膜有许多重要的生物功能,如物质隔离、物质交换和细胞通讯等。在分子水平研究细胞膜
乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)(简称乙脑),是由乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus JEV)引起的一种严重危害人畜健康的虫媒病毒性疾病。该病对人类危害巨大,约三分