DNA甲基化介导的microRNA-33b下调及其在胃癌中的作用

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目的:探讨miR-33b基因上游CpG岛甲基化对该基因在胃癌组织中表达情况的影响,分析其表达与临床统计学资料间的关系。方法:使用Taqman real-time PCR法检测miR-33b在105例胃癌病人癌及癌旁组织中的相对表达情况,并分析miR-33b表达水平与胃癌临床病理特征间的关系,随后于HGC-27及MGC-803胃癌细胞系过表达miR-33b,行细胞增殖、迁移、侵袭及集落形成实验,验证miR-33b对胃癌细胞系功能的影响。Western实验进行miR-33b靶基因c-Myc的检测。最后使用组织基因组DNA快速提取试剂盒提取胃癌组织及正常人血液基因组DNA,经重亚硫酸氢盐处理后,甲基化特异性PCR法检测其上游CpG岛的甲基化程度,PCR产物经琼脂糖凝胶检测,并进行统计分析。结果: miR-33b表达下调与胃癌患者的年龄、性别、发生部位、有无脉管转移、肿瘤分型无相关性,但与肿瘤是否发生远处转移具有相关性(p<0.05),且其低表达与上游CpG岛的甲基化沉默修饰密切相关(p<0.05)。结论:miR-33b的表达在胃癌中受甲基化调控且与胃癌远处转移相关。
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