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羊支原体性肺炎(Mycoplasmal pneumonia of sheep and goats, MPSG)是一种羊的接触传染性疾病,其主要病原菌为绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae, MO),羊感染后主要表现为咳嗽、喘气、渐进性消瘦等临床症状以及肺间质增生性炎症等病理变化,给我国羊养殖业带来巨大经济损失。本研究根据绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体(Mycoplasma arginini, MA)基因的保守序列分别设计了一对特异性引物、优化反应条件,建立了同时检测绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的双重PCR检测方法。本实验室已成功表达了绵羊肺炎支原体的溶血素蛋白,以该重组蛋白作为抗原进行包被,并对反应条件进行摸索,建立间接ELISA方法检测血清中绵羊肺炎支原体的抗体水平。采集临床样品,分别对其进行支原体病原菌的分离培养、绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的双重PCR检测以及绵羊肺炎支原体的间接ELISA检测,对三种检测方法进行结果比较。结果表明分离培养方法与双重PCR方法检测结果符合率为81.37%,且双重PCR检测方法比分离培养方法更敏感;分离培养方法与间接ELISA方法检测结果符合率为94.85%,差异不显著(P>0.05)。本研究建立的绵羊肺炎支原体和精氨酸支原体的双重PCR检测方法和建立的绵羊肺炎支原体间接ELISA检测方法可以满足临床快速、有效、正确地检测病原菌需要,对临床上由绵羊支原体引起的肺炎的快速诊断具有重要的实用意义。