拟南芥Myotubularin2(MTM2)在细胞自噬中的作用研究

来源 :南开大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:maohhmaohh
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
细胞自噬是一条保守而广泛存在于真核生物界中的细胞水平蛋白质和细胞器降解途径。在自噬过程中,PI3K复合体中的激酶亚基VPS34将磷酸肌醇环3位羟基磷酸化形成磷酸肌醇-3-磷酸(PI3P)。PI3P招募下游自噬蛋白如ATG18/WIPI,指导自噬体的形成。由于PI3P也被发现介导液泡蛋白分选、胞吞、胞吐等囊泡运输途径,因此细胞如何特异调控自噬相关的PI3P水平是自噬研究的一个重要问题。在动物与酵母中的最新研究发现,某些PI3P磷酸酶Myotubularin(MTM)能够介导自噬特异的PI3P水解。拟南芥基因组中有两个MTM,但它们是否参加自噬调控尚属未知。本文发现拟南芥Myotubularin2(MTM2)负调控自噬。   本文通过对MTM2的T-DNA插入突变体mtm2的研究发现,mtm2生长较对照野生型有优势,尤其是其抽薹及株高方面显著早于和高于野生型,而mtm2在自噬诱导条件下生长优于野生型。另一方面,中等水平过表达MTM2,其生长不如野生型,同时其对自噬的响应敏感。通过对MTM2的组织特异性表达模式及蛋白亚细胞定位的观察,发现其在植物发育的各个阶段均有低水平表达;其蛋白定位于质膜及其附近的囊泡上。对MTM2底物特异性分析发现,其N端的PH-GRAM结构域负责结合底物,包括PI3P。与此同时,我们提供了一个新的检测植物自噬的株系,即将pATG8a∶GFP-ATG8a引入野生型拟南芥中,其能稳定而良好的响应自噬。将此指示蛋白引入mtm2后,从细胞及蛋白水平分别观察和检测ATG8的含量,发现其均高于野生型。将mtm2与自噬缺失突变体atg2和atg10分别杂交后,双纯合突变体对缺氮和缺碳诱发的自噬响应表现出与atg一致的表型,同时从蛋白水平检测ATG8的表达模式也与atg表现一致。进一步对MTM2在蛋白分选途径和胞吞胞吐途径的检测,发现mtm2中的这些途径均未受到影响。综上所述,MTM2只参与负调控自噬,是自噬特异的PI3P磷酸酶。
其他文献
家蚕作为驯化成功的寡食性经济昆虫已经有超过5000年的历史,养蚕业和蚕丝产业目前仍是许多发展中国家农业的重要组成部分。养蚕业每年能够为我国蚕农创造超过400亿的经济价值
用磷钨酸(PW)以浸渍法改性HMCM-22分子筛,并用XRD,SEM,FT-IR对催化剂进行表征,发现改性后的HMCM-22分子筛原有的结构和特征未发生变化。在改性后的分子筛应用于催化十二醇与五氧化磷(P2O5)摩尔比为2:1的合成磷酸酯的酯化反应中,产物中单酯(MAP)的选择性有了显著的提高,说明了磷钨酸(PW)与HMCM-22分子筛的活性中心发生了协同作用促进了酯化反应的进行,同时也表明了该催
学位
<正>1案例资料案情摘要2012年12月4日16时许,吴某(男,76岁)被发现死在本村果园看护房内。现场情况现场位于村内果园看护房内。此房东侧是桃园,南侧是空地,西侧是院门,北侧是
会议
滞育是昆虫为适应不良环境而形成的一种在卵、幼虫、蛹或成虫期发育停滞的生理现象,对昆虫生存和繁殖具有重要意义。鳞翅目模式昆虫家蚕是卵滞育的典型代表,但其滞育的分子机制