马铃薯是世界第四主粮作物,疮痂病是由植物病原链霉菌引起的一种土传病害,广泛存在于全球马铃薯种植区,造成严重的经济损失。Thaxtomin A为马铃薯疮痂病链霉菌产生的特征性物质,其毒理学的研究尚未见系统报道。本研究分为四个部分:1、病原链霉菌的分离鉴定。对病薯典型病斑分离纯化培养,通过科赫法则验证,筛选获得一株致病力较强的病原链霉菌DH-1。2、Thaxtomin A在病薯中的分布。建立和优化了thaxtomin A的高效液相色谱-质谱检测方法;分析不同等级疮痂病马铃薯及不同深度疮痂病斑中thaxtomin A与症状的关系;对DH-1菌株发酵培养,检测菌丝和发酵液中thaxtomin A的含量。研究发现thaxtomin A主要分布于薯块表层病斑中,5mm处平均含量锐减,10mm处未检出。3、Thaxtomin A的小鼠体内毒性研究。根据薯块中thaxtomin A的含量数据选择合适剂量,进行小鼠体内毒性研究。结果显示,持续摄入30天后,thaxtomin A对小鼠肝脏造成程度较轻的可逆性损伤。同时,小鼠肠道营养吸收受阻,导致机体以增长小肠长度方式,加长食物在肠道内存留时间,以满足机体营养供给,但未造成病理改变。4、Thaxtomin A免疫损伤机理研究。使用流式细胞术检测机体肝脏、脾脏、小肠、肠系膜淋巴结中免疫细胞变化,以进一步明确thaxtomin A是否会对机体产生毒性作用,引发机体产生炎症反应。结果显示,肝脏中,thaxtomin A组小鼠树突状细胞比例降低(p<0.05),B淋巴细胞比例显著增加(p<0.05),与肝脏病理观察结果相符。肝脏Treg细胞和Teff细胞中转录因子T-bet的表达水平均明显升高,转录因子GATA-3表达水平无差异,提示thaxtomin A导致的小鼠炎症反应可能是I型T细胞反应为主。