黄龙止咳口服液对咳嗽变异性哮喘模型小鼠肺组织TLR4/MyD88/NF-κB通路的作用机制

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目的:建立咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)小鼠模型,观察黄龙止咳口服液对CVA模型小鼠气道炎症的影响,并对TLR4、MyD88和NF-κB进行检测,进一步探讨黄龙止咳口服液减轻CVA气道炎症的可能作用机制。方法:将50只BALB/c小鼠随机分成5组,分别为:正常组、模型组、地塞米松组、黄龙止咳口服液低剂量组和高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组进行造模。采用卵蛋白、氢氧化铝腹腔注射致敏并吸入卵蛋白激发法建立咳嗽变异性哮喘小鼠模型,黄龙止咳口服液组分别以0.75 g/kg和1.5 g/kg进行灌胃,每日1次,持续14天后处死小鼠。采集血清,取右肺组织用于蛋白质检测,左肺用于组织病理染色。ELISA法检测血清中白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、IL-5、IL-13的水平。分离小鼠肺组织,HE染色后观察肺组织形态变化。Western Blot技术检测肺组织中Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)、髓样分化因子(myeloiddifferentiationfactor88,MyD88)及核因子-κB(NF-κB)的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组血清中细胞因子IL-4、IL-5、IL-13水平均明显升高,HE染色可以看出支气管及血管周围明显有炎症细胞浸润。与模型组比较,地塞米松组、黄龙止咳口服液低剂量组和高剂量组病理切片表现均有所改善,血清中各炎症细胞及细胞因子水平均明显降低。与正常组相比,模型组小鼠肺组织中TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达增高,差异有统计学意义(P<0.01)。黄龙止咳口服液低、高剂量组与模型组相比,TLR4、MyD88和NF-κB表达明显下降(P<0.01)。结论:1.黄龙止咳口服液能改善咳嗽变异性哮喘模型小鼠气道炎症及气道高反应性。2.TLR4/MyD88/NF-κB信号通路参与咳嗽变异性哮喘小鼠的气道炎症反应。3.黄龙止咳口服液可以通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路调控炎症细胞因子的释放,从而调节小鼠气道炎症,达到改善咳嗽变异性哮喘的目的。
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