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尾型同源框转录因子Cdx2在调控小鼠早期胚胎滋养外胚层(Trophectoderm, TE)的发育过程中起关键作用,干扰cdx2基因的小鼠胚胎能形成早期囊胚但不能维持囊胚腔,胚胎不能着床。但cdx2在牛早期胚胎发育及滋养层与内细胞团(Inner cell mass, ICM)细胞分化过程中的相关分子机制还不清楚。本试验研究了cdx2基因在牛体外受精胚胎发育过程中的动态表达变化,并利用干扰cdx2基因的体细胞获得克隆胚胎,探讨了cdx2在克隆胚胎发育及第一次细胞分化过程中的作用。试验结果如下：1)通过过表达cdx2的慢病毒颗粒获得了稳定表达外源cdx2的牛胎儿成纤维细胞系,转基因细胞中cdx2mRNA表达水平是对照组的24.42倍；2)分别选取cdx2基因CDS序列的上、中、下游三个不同区域构建成干扰载体pLL3.7-shRNA488、pLL3.7-shRNA621、pLL3.7-shRNA672及pLL3.7-shRNA-Control,过表达cdx2的细胞经不同敲减载体病毒颗粒感染后,相对于对照组其cdx2的表达水平分别为0.387、0.183、0.123和0.773,因此选用pLL3.7-shRNA672载体用于其后的胚胎干扰试验；3)在对牛体外受精胚胎进行检测时发现,cdx2和oct4在MII期卵母细胞和早期胚胎发育各时期均有mRNA表达,囊胚期的内细胞团和滋养层细胞中均有Cdx2和Oct4蛋白的表达,而tead4在MII期卵母细胞中没有表达,到8-细胞期才被激活；4)以表达敲减片段shRNA672的体细胞为核供体生产的克隆胚胎中,cdx2的表达水平仅为对照组的0.33,但囊胚发育率没有显著差异；5)进一步分析显示,敲减cdx2没有显著影响gata3、nanog的表达,sox2和oct4的表达量略有下降,而tead4的表达量显著上调至对照组的10.53倍,ifiiτ的表达量则下调为对照组的0.36倍。本试验结果表明,cdx2基因mRNA在牛早期胚胎发育不同阶段均能检测到,而仅在囊胚期检测到其蛋白的表达。在干扰cdx2基因的克隆胚胎中,cdx2的表达受到显著影响,但不影响克隆胚胎的囊胚发育率。敲减cdx2后没有影响囊胚中gata3、 nanog的表达,而sox2和oct4的表达量略有下降,但显著影响了tead4和ifnτ的表达。