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本文按照中医理论以白头翁、黄柏为主要方剂设计中草药复方,研究复方及其主要方剂对大肠杆菌的体外抑制作用以及对大肠杆菌感染小鼠的体重、采食量、腹泻和肠道微生物区系的影响,并通过最大给药量试验,为白头翁、黄柏及其复方提取物的临床应用提供依据。试验一白头翁、黄柏及其复方提取物的体外抑菌作用试验采用倍比稀释法分别测定白头翁、黄柏、白头翁:黄柏(1:1)和中草药复方提取物对大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),每个浓度设3个重复,进行3次重复试验。结果显示,各组中药提取液对大肠杆菌的生长均有抑制作用,其中以复方的抑菌作用最为明显,MBC为0.1250g/ml:黄柏与白头翁:黄柏(1:1)配伍提取液的抑菌效果一致,MBC为0.2500g/ml;白头翁的抑菌效果不明显,表现为耐药。以上结果表明,复方的抑菌作用并不是各组成成分效果的简单相加,复方中的黄柏具有显著的抑菌作用,其与其它单剂显著的协同作用使复方能有效的抑制或杀灭病原菌。试验二白头翁、黄柏及其复方提取物对小鼠腹泻的防治作用试验选用50只体重为18-22g的ICR小鼠,随机分成五组:空白对照组和给药组(复方、黄柏、白头翁以及白头翁:黄柏(1:1)提取液组),每组10只,雌雄各半,预试期5d,正试期13d。每天按照4g生药/kg体重剂量定时灌胃给予放置室温的各药物提取液,空白对照组给予等剂量的蒸馏水。第10d每只小鼠按0.2ml/10g体重剂量腹腔注射108个/ml大肠杆菌菌液,建立小鼠细菌性致腹泻病理模型,观察各提取液对小鼠的腹泻次数、稀便率的影响,第13d收集粪样,变性梯度凝胶电泳研究肠道微生物区系的变化。结果显示,造模当天对照组的体重变化最为明显,与其他各给药组均差异显著(P<0.05),腹泻最为严重;各提取液对大肠杆菌引起的腹泻均有一定的抑制作用,其中复方的抑制效果最为明显,与对照组相比腹泻次数降低了51%(P<0.05),而其他各给药组之间差异不显著(P>0.05); DGGE图谱分析显示复方组的条带数和多样性指数均显著多于其他处理组(P<0.05),而其他各处理组之间差异不显著(P>0.05), UPGMA相似性聚类分析则显示各给药组相似性系数都大于63%,且都归于一簇(除5号),而对照组的相似性系数在56%-69%之间,个体差异较大。以上结果表明,添加中草药可以有效降低大肠杆菌引起的小鼠腹泻,改善小鼠肠道微生物区系,使肠道微生态更加趋于优化和平衡,从而保证肠道菌群的相对稳定,其中以复方提取液的作用最为明显。试验三白头翁、黄柏及其复方提取物的安全性试验选用40只体重为18-22g的ICR小鼠,随机分为四组:空白对照组和给药组(复方、黄柏以及白头翁提取液组),每组10只,雌雄各半,适应期5d,采用最大给药量法进行急性毒性试验,连续观察7d。结果显示,各给药组按0.4ml/10g体重最大给药量6h内两次灌胃小鼠各提取液(相当于136.8g生药/kg体重),与对照组相比,体重、采食量、血液生化指标和脏器系数均无显著性差异(P>0.05),对其内脏器官进行组织学检查,也均无明显病理变化。以上结果表明,各提取液对实验小鼠均安全无毒副作用,临床使用安全性较高,可以应用到生产中。综上所述,白头翁、黄柏及其复方提取物对大肠杆菌均有良好的抑制效果,而复方由于其组成中含有多种抗菌成分,能够有效改善小鼠肠道微生物区系,促进有益菌的生长,抑制有害菌的生长,从而能够显著降低大肠杆菌所引起的腹泻,同时从毒副作用的角度来看,各提取液是安全的,因此在畜牧业中具有广阔的应用前景。