人脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病兔足部病变阳虚血瘀证的实验研究

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目的:本实验旨在研究人脐带间充质干细胞(HUMSCs)移植治疗糖尿病兔足部病变阳虚血瘀证的可行性,为临床治疗糖尿病足部病变阳虚血瘀证提供理论依据。材料与方法:①建立糖尿病兔动物模型20只,将四氧嘧啶经耳缘静脉在30s内注射完毕,监测血糖,防止严重低血糖发生,48、72小时随机血糖大于11.1mmol/L;②成模72小时后将糖尿病兔模型给予氯胺酮(30mg/Kg)联合氟哌啶醇(0.5mg/Kg)麻醉后,自两侧腹股沟韧带至膝关节上下做一纵行切口行股动脉及其分支分离术,分别结扎并离断股动脉及分支,制备下肢阳虚血瘀证动物模型;③取经DIL染料标记的人脐带间充质干细胞悬液分15点(每点平均细胞数约为1.67×10~6)注射于左后肢为移植组,右后肢注射生理盐水为对照组,④分别于第15,30天后行DSA观察血管生成及变化情况;取双侧后肢内收肌和腓肠肌标本,病理切片观察血管新生程度,CD31免疫组化检测毛细血管密度并进行皮温测定,所得数据进行统计学处理。结果:1. HUMSCs移植组皮温较生理盐水对照组明显增高,差异有显著性意义(P<0.05)。2. HUMSCs病理切片显示移植组较生理盐水对照组侧支血管明显增多。3. CD31免疫组化标记HUMSCs移植组较生理盐水对照组毛细血管密度增加,差异有显著性意义(P<0.01)。4.于HUMSCs移植后第15、30天腹主动脉造影结果显示移植后第15天移植组结扎处远端毛细血管生成明显,血管多呈较细呈网状;对照组血流受阻于股动脉结扎处,近端血管稍有扩张,远端毛细血管生成不明显;第30天移植组毛细血管较第15天增多增粗,而对照组生成血管少于移植组。结论:人脐带间充质干细胞移植可使糖尿病兔足部病变阳虚血瘀证下肢皮温明显增高、建立侧支血管显著增多、毛细血管密度显著增加,为糖尿病足部病变阳虚血瘀证提供了一种安全、有效的治疗方法。
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