DM/PM肌肉微血管病变研究及机理探讨

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目的:通过研究皮肌炎/多肌炎(DM/PM)患者骨骼肌中微血管内皮细胞CD34、VE-钙粘蛋白、CD61和HLA-DR的表达、血清中抗内皮细胞抗体(AECA)以及血清对体外脐静脉内皮细胞(HUVEC)活性的影响,以探讨DM/PM患者肌肉中微血管的免疫病理改变和形成机理,为DM/PM的早期病理诊断和发病机理提供新的理论依据。方法:(1)骨骼肌中微血管内皮细胞上的CD34、VE-钙粘蛋白、CD61、HLA-DR等用免疫组化的方法进行检测;(2)血清AECA的测定采用ELISA法;(3)用MTT法检测血清对体外HUVEC活性的影响。结果:(1) CD34标记的血管数目:DM患者肌纤维间微血管数明显减少,而PM的正常;(2) VE-钙粘蛋白:在DM的部分束周区表达减少,并与炎症细胞浸润呈一定的负相关(r=-0.92783, P<0.0001);而PM无明显改变;(3) HLA-DR:DM和PM的肌纤维和肌肉中的微血管内皮细胞上均有表达,阳性率分别是87.5%(DM)和4/5(PM);正常对照组肌纤维为阴性,仅少数血管内皮细胞呈弱阳性;(4) CD61:16例DM中5例呈阳性表达(束周区),5例为弱阳性,阳性率为62.5%,而PM仅1例呈弱阳性,正常对照组为阴性;(5) AECA:DM/PM组的血清AECA(0.9078±0.3038)高于正常对照组(0.4399±0.1820)(P=0.000),并且与血清中IgM的高低呈正相关关系(r=0.5473,P=0.0428),伴肺间质病变(interstitial lung disease,ILD)的DM/PM患者血清AECA水平高于无ILD的DM/PM(P<0.05),DM/PM患者治疗后的血清AECA(0.8701±0.2018)低于治疗前(1.2266±0.3098)(P<0.001);(6)血清对体外培养的HUVEC活性的影响(MTT法):DM/PM组与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05),但AECA阳性患者的血清和治疗后的血清在体外作用24h后,与正常对照组相比HUVEC活性明显下降(P<0.05),而在48h和72h后治疗后血清与治疗前的相比差异无显著性(P>0.05)。结论:(1) HLA-DR在DM/PM的肌肉微血管内皮细胞和肌纤维中表达上调(正常的为阴性),提示HLA-DR在DM/PM的发病中可能起一定的作用,并可作为DM/PM肌肉病变的诊断性标记;(2) DM患者肌肉中微血管减少,提示DM肌肉中微血管被损伤和丢失;(3) DM肌肉中微血管内皮CD61阳性,表明有血管新生,结合DM肌肉中微血管数减少,可用于DM与PM的鉴别;(4) DM肌肉微血管内皮细胞VE-钙粘蛋白表达下调,且与炎症呈负相关,提示DM肌肉微血管的完整性被破坏,从而有利于肌肉炎症的形成;(5) DM患者血清AECA高于正常组,伴ILD的DM/PM患者血清AECA高于无ILD的DM/PM,治疗后血清AECA水平下降,表明AECA在DM/PM的发生和发展以及ILD的发生中起重要作用,血清AECA水平可作为DM/PM的病情判断和疗效的指标;(6) DM/PM患者的血清在体外对HUVEC的活性无明显影响,但AECA阳性患者的血清和治疗后的血清体外作用24h对HUVEC活性均有明显抑制作用(P<0.05)。
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